概念:指不帶芽和帶1個以上定芽或不定芽的,包括塊莖、球莖在內的幼莖切段的無菌培養。
培養目的:快速繁殖。也可研究莖細胞的生理,以及篩選突變體育種。
快繁優點: 培養技術簡單易行,繁殖速度較快;芽生芽方式增殖的苗木質量好,且無病,性狀均一;解決不能用種子繁殖植物的快速繁殖問題等。
1.材料選擇和處理
取生長健壯無病蟲的幼嫩枝條或鱗莖盤,木本則取當年生嫩枝或一年生枝條,剪去葉片,剪成3~4cm的小段。
注意:1)盡力取頂部莖切段和頂芽,但由於頂芽少可利用腋芽,但盡力用莖上部的腋芽。2)盡量在生長期取芽,休眠期成活率降低。如蘋果在3~6月取材的成活率為60%,7~11月下降到10%,12~2月都在10%以下。
在自來水中衝洗1~3小時,用75%酒精滅菌30~60秒,再用0.1%升汞浸泡3~8分鍾,或用飽和漂白粉浸泡10~20分鍾,因材料老嫩和蠟質多少而定時間。最後用無菌水衝洗數次,以備接種。
2.培養選MS培養基,加入3%蔗糖,用0.7%的瓊脂固化。培養條件保持25℃左右,給予充分的光照和光期。
培養物的變化:1)基部切口上長出愈傷組織,呈現稍許增大,控製不要過大。2)而芽開始長長,有時會出現叢生芽,培養方式或是培養出芽梢或是培養芽叢,從而得到無菌苗。
培養基:促進腋芽增殖用6-BA是最為有效的,依次為Kt和Zt等。生長素雖不能促進腋芽增殖,但可改善苗的生長,也要適量加入。GA對芽伸長有促進作用。
繼代擴繁:包括二種途徑,一是促進腋芽的快速生長,二是誘導形成大量不定芽。第一種途徑的好處是不會產生變異,能保持品種優良特性。且方法簡便,可在各種植物上使用,每年從一個芽可增殖10萬株以上。第二種途徑雖會產生變異,繁殖係數較高,適於多數植物。
生根培養和移栽馴化與莖尖培養相似,不再重複。
同樣注意馴化管理。要進行煉苗,小心移栽,初期濕度要大,基質通氣濕潤,保濕保溫,特別要精心管理等。
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