中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索

植物組培莖尖培養



錄入時間:2011-12-28 9:55:06 來源:互聯網

  

概念:是切取莖尖部分或莖尖分生組織部分,進行培養的過程。這是組織培養中用得較多的外植體。因為莖尖分生區是四個分區的主要部分。

 

莖尖培養可分為微莖尖培養和普通莖尖培養。

 

1)微莖尖:指帶有1-2個葉原基的生長錐,其長度不超過0.5mm()

 

2)普通莖尖:指取幾mm到幾十mm長的頂芽尖及側芽尖。這裏主要介紹後者。

 

特點:技術簡單,操作方便,易成活和分化,成苗時間短。

 

步驟如下:

 

   1.取材:挑選潔淨、無汙染,生長不久的莖,從植物的莖、藤或匍匐枝上切取2cm以上的頂梢。木本植物可事先對莖尖噴幾次滅菌藥劑。用於普通莖尖培養。

 

   2.消毒  將采到的莖尖切成0.51.0cm長,並將大葉除去,休眠芽預先剝除鱗片。()將莖尖置於流水衝洗幹淨,再在95%的酒精中處理30秒,然後在稀釋20倍的次氯酸鈉中浸5~8分鍾,最後用無菌水衝洗數次,瀝幹後準備接種。

 

   3接種  為了減少汙染,在接種前再剝掉一些幼葉,使莖尖為0.5cm大小左右。用作快速繁殖。

 

注意:一要防褐化。接種時,不用鏽刀,動作敏捷,隨切隨接,用15%VC液浸泡處理。

 

      二要防幹燥

 

   4.培養

 

   1)培養基:采用MS培養基或略加修改,或補加其它物質。也可用其它培養基如White,Heller等。

 

培養基中生長素是必須的,如2,4-DIAA,NAA等,但是濃度不能太高,一般用0.1mg/L左右,若高易產生畸形芽或形成愈傷組織。

 

2)培養問題處理:

 

莖尖在培養過程中會出現生長太慢、生長太快和生長正常等三種類型。

 

I生長太慢:接種後莖尖不增大,隻是莖尖逐漸變綠,出現綠色小點,細胞逐漸老化而進入休眠狀態,或者逐漸變褐死亡。引起原因的是生長素濃度太低,或是溫度過低或過高;

 

II生長太快型:是接種後莖尖迅速增大,在莖尖基部產生愈傷組織,並迅速增殖,而莖尖不伸長,久之莖尖也形成愈傷組織,從而喪失發育成苗的能力。引起原因一是生長素濃度過高,引起細胞瘋狂分裂而導致愈傷組織的形成。二是光照太弱或溫度太高。

 

III生長正常型是接種後莖尖基部稍增大並形成少量愈傷組織,莖尖顏色逐漸變綠,並逐漸伸長,葉原基發育成可見的小葉,進而形成小苗。

 

   3)培養條件:培養時每天光照可長一些,最長達16h/d,照度1500-3000Lx,溫度25±2℃。並且根據不同植物種類,或者隨培養過程的不同,給予適當的晝夜溫差等處理。

 

注意:防培養基幹燥,由於莖尖培養時間較長,通過定期轉移、嚴加封口等。一般莖尖培養在40天左右可直接長成新梢。

 

   3)繼代培養  用莖段切割法。

 

繼代培養可用MS0培養基。或用生長物質較低的MS培養基。

 

也可邊增殖邊生根培養

 

   4)誘導生根

 

I 1/2 MS培養基, 並隻加入生長素類調節物質,如NAA IBA等。注意濃度

 

II)也可將切下的新梢基部浸入50100ppmIBA溶液處理48小時,然後轉移到無激素的生根培養基中。

 

III注意較高濃度的生長素對生根有抑製作用。

 

5移栽馴化

 

指標:發現新梢基部生有較濃密的不定根,生長健壯而發達,長度在1cm以內。

 

移栽:可先進行幾天煉苗程,取出---洗培養基--栽入馴化器皿—基質蛭石:珍珠岩:草炭土為1:1:0.5

 

    栽後管理:1)初期保持濕度。基質澆透水,床麵澆濕,搭小拱棚等,並且初期要常噴霧處理,2)後期逐漸減少濕度。拱棚兩端打開通風,減少噴水次數。以後揭去拱棚,並控製水分。

 

    溫度管理上要掌握適宜的生根溫度,最適宜的溫度是1620℃,春季地溫較低時,可用電熱線來加溫。

 

    光照:初期弱光照,加蓋遮陽網或報紙等,後期可直接利用自然光照。

 

 

上一篇:植物組培離體根培養

下一篇:植物組培莖段培養

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294