培養基在任何一個微生物實驗室中都起到關鍵的作用，它廣泛用於不同病原微生物的分離、鑒定和藥物敏感性測定。大多數實驗室經常自己製備培養基用於診斷和研究。但是為確保培養基的質量並能夠提供令人滿足的結果，適當的質量治理係統是必要的。為了這個目的，製備好的培養基在使用之前應檢查幾個參數。
本文的目的就為確保培養基質量對需要考慮的參數及所需試驗進行討論，並根據需要評價的參數把培養基質控的程序分為幾個部分。
一、原材料參數
培養基的質量直接依靠於用來製備培養基的原材料的質量。水是製備培養基最主要的原材料，需要檢測的參數有銅離子的含量，導電性和pH。最理想的情況應該是水中不含銅離子，由於它抑製微生物的生長。導電性應該小於15μS(微西門子)。水的pH應偏酸，但是不能小於5.1[1]。
傾倒培養基所用的帶蓋培養皿也是一個重要的因素。一般培養皿是經環氧乙烯(EtO)滅菌或是γ射線照射滅菌的。假如是用EtO滅菌的應該檢測殘餘的EtO毒性，由於它可能影響微生物的生長。EtO可以用標準的氣相色譜的方法測定，其最大的答應殘餘量為1μg/g。如使用玻璃器皿隻可用硼矽酸鹽的，由於碳酸鹽玻璃可以將堿瀝濾到培養基中。
培養基的製備中還要用到很多添加劑，其中最重要的是血。所以血的質量對含血培養基的質量起至關重要的作用。在製備培養基之前應該小心檢查血的無菌性、同質性、粘性和顏色。對於其它的添加劑，應該考慮分析的證實書和滅菌情況。
二、滅菌參數：
培養基滅菌在培養基的質量中具有重要作用。一般用自動高壓鍋進行培養基滅菌。但是，高壓的時間和培養基的量要嚴格控製。複合培養基經熱處理可能由於直接的熱降解或者是成分之間的反應可能造成營養成分的丟失。所以優化加熱過程把熱損失降到最小是非常重要的。建議使用的循環是第1階段：20～121℃，第2階段：<100～121℃，第3階段：121～121℃，第4階段：121～80℃。
一次消毒的培養基體積應較少，最好是2升。常規應用指示劑監測滅菌過程；溫度和壓力應該經常檢測。可用滅菌指示劑如生物指示劑和Bowie Dick實驗檢查滅菌過程的有效性。可用生物指示劑如嗜熱脂肪芽孢杆菌監測殺傷芽孢的效果。
三、物理參數
培養基的表麵特征可表明質量的好壞。應該檢查培養基的物理參數包括：有無過量的氣泡或坑，培養皿填充是否均勻，培養皿中的培養基有無裂開、冰凍或結晶。
所有上述提到的參數可以通過肉眼檢查。但是培養基填充的均勻程度、培養基的厚度可以在4個點檢查。這是4點是指培養皿兩個成恰當的角度的直徑的兩個端點，這樣可同時檢測到四個麵。記錄4個點的厚度並計算均勻厚度。培養皿的厚度以均勻厚度表示，應該在4.0± 0.2 mm之內。
培養基的pH值也是一個必須要檢測的重要物理參數。可通過用標準的用標準液矯正過的pH計丈量製備好的待高壓的培養基確定。
四、微生物參數
生長支持特性是培養基質控中最重要的參數，需要用標準的接種方法進行定性定量檢測。並且在測定新的批號時，應該同時接種新批號和舊批號。
臨床實驗室標準國家委員會（NCCLS）已經為各種培養基所用質控微生物的理想接種濃度和預期的結果列出了一些指導原則。每種培養基的接種可按如下方法預備：
質控微生物接種於大豆酪蛋白消化(SCD)肉湯培養基中，孵育4小時獲得相當於0.5個麥氏標準管的濃度的細菌。這種標準濃度的細菌懸液應該能獲得107-108cfu/mL（625nm的吸光度為0.08～0.1）。選擇性培養基和非選擇性培養基應分別接種10uL 10倍和100倍普通生理鹽水或SCD肉湯稀釋的菌液。這些稀釋的菌液用來評估價培養基的生長支持特性。每一種接種物做雙份接種。接種後將培養皿放置在37°C 24小時，觀察菌落的特性和生長特性。結果報告可在如下表格中填寫有無生長以及生長特性。（見表1）
實際上，盡對的微生物生長的測定或者耗時的或者需要特殊的儀器設備。菌落大小可以用來表明生長特性，但也是不敏感的指標。菌落特征的觀察是主觀的，且難以記錄。
像流行病學方法及可提供可比較數據的比例方法適合於常規的培養基微生物培養特性的質量控製，可用於檢測培養基的生長和抑製特性。
五、流行病學方法
這是一種簡單的數學方法。同時測定盡對生長指數（AGI）和相對生長指數（RGI）。這種方法基於將接種物不斷劃線直至細菌消失。這種方法可以用來比較不同批號的培養基也可以用來比較選擇性和非選擇性培養基。
這種方法是將一滿菌環的選定的實驗菌株接種到5ml心腦浸汁肉湯培養基中孵育4小時。將含有培養基的培養皿分成4部分並按如圖所示方法劃線。
用一個微升菌環挑一滿環培養物並按A1, B1, C1, D1, A2, B2 .. 直到 D5的方法劃線，中間不用燒菌環也不用再挑菌液。用同樣方法在質控平板上操縱。孵育後記錄測試板和質控板出現培養物的最後的點。這就是測試板和質控板的終點。這些結果可以用來計算培養基的AGI和RGI。AGI通過記錄終點得到（見表2）。
RGI是測試板和質控板AGI的比值。
RGI隨著培養基的用途而變化。為了檢查有效性，RGI應接近100%。但是為了檢測抑製性，RGI應接近0%。選擇性瓊脂的特性可以用一個用來測試分離特性的菌株和一個用來測試抑製特性的菌株進行測定。
六、生產率(PR)
測定培養基的生產率是測定代測培養基相對於質控培養基的特性的另一種方法，指控培養基應該是一種營養瓊脂如胰蛋白腖大豆瓊脂培養基(TSA)。所用接種物必須相同，PR通過計算測試和質控培養基上的克隆數得到。
PR=測試板上的克隆數×稀釋倍數
質控板上的克隆數×稀釋倍數
這種方法是對Miles和Misra技術的改進。將測試用的培養物過夜培養，用緩衝蛋白腖水做10倍倍比稀釋。將測試板分成4等份，並且每一部分標記好所用培養物的稀釋倍數。（如圖2）
從高濃度開始，將相應稀釋倍數的培養物放在相應的1/4圓內。並對質控板做同樣的操縱。將每滴培養物在相應的1/4圓內塗布，並在37°C培養18小時。計數測試和質控板最低稀釋倍數的克隆數。
七、汙染參數
這也是決定培養基質量非常重要的因素，一批培養基在使用之前必須仔細檢查汙染情況。建議將一批製備的培養基在室溫放3天以檢查汙染情況。或者從一批測試培養基中拿出兩個放在孵箱內37°C孵育24小時。經必要的孵育後，檢查有無生長。假如有生長，從同一批製備的培養基中再拿出兩個，重複上述過程一次。假如再次出現汙染，表明製備的這一批培養基有汙染。建議當一批培養基汙染超過10%應棄往。
八、凝膠強度參數
凝膠強度表明培養基中瓊脂凝固的程度。凝膠強度通過一個三角架進行丈量，這個三角架中心有一個棒，用來給瓊脂加壓。這個棒的底端有一個圓形的部分，用來放在培養基表麵。棒的頂端有一個平台，平台上可以放定量的砝碼。中心棒的球形的部分放在培養基上，砝碼一個一個地放在上麵的平台上並觀察一段時間。直到瓊脂在中心棒的壓力下斷裂。計算瓊脂的強度時須忽略中心棒的重量。中心棒施加在瓊脂表麵的壓力可以通過下麵的公式計算：Wpr2。公式中的w為放在平台上的砝碼的重量，r為中心棒底端球形部分的半徑。P=3.14。大約300-500dynes/cm2的凝膠強度是比較滿足的。
九、現狀
用於臨床微生物實驗室培養基的質控對從感染的病人體內獲得正確的可解釋的分離菌株是非常關鍵的。用標準的方法檢測培養基可以節省時間和資源。最近在安大略湖質控應用情況的調查發現人們根本沒有按NC CLS QA的建議往做。而且建議使用的ATCC菌株隻有一半的實驗室使用。培養基的批失敗率在0.10%-9.87%之間（均勻1.01%）。失敗的原因有不生長（39.9%），不抑製（18.6%），非無菌（17.9%），溶血（7.2%）和表麵破壞（16.3%）。
另外一項調查發現批失敗率較小(0.5%)。Krisher等指出109個被調查的實驗室中有41個使用50% 或更少NCCLS M22-A2提供的信息。在最近的NCCLS M22-A3文件中將培養基按質控失敗率進行分類。失敗率大於0.5%的培養基需要使用者做全部的質控，被稱之為非免除培養基，如營養肉湯，Todd-Hewitt 肉湯, 麥康凱山梨醇瓊脂, 含有IsoVitaleX 的巧克力瓊脂, (r)Campylobacter血瓊脂,含有5%羊血和環己酰亞胺的心腦浸液(BHI)。失敗率小於或即是0.5%的培養基是免除培養基，建議隻做最低限度的質控。可以節省本錢避免不必要的重複質控。
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