免疫印跡法檢測幽門螺杆菌抗體結果分析

【摘要】  目的 評價免疫印跡法檢測Ⅰ型和Ⅱ型幽門螺杆菌抗體的價值。 方法 采用免疫印跡法對門診隨診患兒227例進行分型檢測。 結果 檢出HP陽性85例,陽性率為37.44%,其中Ⅰ型58例,占68.23%;Ⅱ型27例,占31.76%。 結論 免疫印跡法檢測幽門螺杆菌抗體具有較高的敏感性和特異性。方法簡單，時間短,對臨床治療有重要的指導意義。

【關鍵詞】  幽門螺杆菌 免疫印跡法 空泡毒素 細胞毒素相關基因A

幽門螺杆菌（Helicobacter,簡稱HP）是慢性胃炎﹑消化性潰瘍和非潰瘍性消化不良的重要因素，是胃癌的危險因子。HP在全球人群的感染率超過50%，而且隨著年齡的增加有遞增趨勢［1］。表達空泡毒素（VacA）蛋白和細胞毒素相關基因A（CagA）的HP菌株致病力強。本文對患兒血清用免疫印跡法進行檢測並分型,探討不同型別HP與患者的關係，及時指導臨床治療。

　　1  材料與方法

　　1．1  樣本  於2006年8月～2007年8月到我院門診患兒，抽血2ml，留取血清待查。

　　1．2  試劑與方法  采用免疫印跡法進行分型，試劑盒由上海元穀科技發展有限公司提供。本試劑原理是先將幽門螺杆菌的混合抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，按分子量大小不同分開，再將其轉移至硝酸纖維膜，如果被檢血清有相應抗體，應用酶聯免疫吸附反應，就會在抗原的相應位置出現顯色區帶，即可判斷HP感染類型。

　　1．3  抗體判斷  將印跡膜上端起始線與標準帶起始線對齊，在對應位置出現帶型既可判斷為相應的抗體:①128KD﹑116KD出現顯色帶或128KD單獨出現，可同時伴有110KD顯色判斷為CagA（+）抗體；②95KD﹑91KD出現顯色或95KD單獨出現，可同時伴有87KD顯色帶判斷為VacA（+）抗體；③66KD出現顯色帶判斷為尿素酶B(UreB)(+)抗體;④30KD出現顯色帶判斷為尿素酶A(UreA)(+)抗體。

　　1．4  分析結果  ①CagA或VacA抗體同時陽性或任意一種陽性，為Ⅰ型HP感染；②僅出現尿素酶A和尿素酶B抗體陽性，為Ⅱ型HP感染；③CagA， VacA及Ureas三種抗體陰性，既為HP抗體陰性。

　　2  結果

　　2.1  227例患兒  HP感染85例，陽性率為37.44%,其中Ⅰ型58例,占68.23%;Ⅱ型27例,占31.76%,見表1。

　　表1  227例患兒HP感染結果（略）

　　2.2  不同年齡段HP感染情況  見表2。

　　表2  1～14歲不同年齡段HP感染情況（略）

　　3  討論
   
　　目前臨床上根據HP菌株及是否表達相應蛋白將HP分為兩種類型：Ⅰ型為產細胞毒素HP菌株，能產生空泡毒素和細胞毒素相關蛋白，其致病力強，能導致廣泛的炎症，Ⅱ型為不能產生細胞毒素的HP，不含細胞毒素相關基因A(CagA)，不表達VacA毒素和CagA蛋白，這類菌株毒性小，感染後一般僅引起輕度慢性淺表性胃炎而無明顯的臨床症狀［2］。據文獻［3,4］報道，CagA蛋白是Ⅰ型HP致病性的標誌物，現已確認HP是慢性活動性胃炎﹑消化性潰瘍﹑胃黏相關淋巴組織（MALT）淋巴瘤和胃癌的致病因素。1994年世界衛生組織/國際癌症研究機構（WHO/IARC）將幽門螺杆菌定為Ⅰ型致癌原。HP作為胃癌的Ⅰ類致癌因子，其中CagA與 VacA是在致癌過程中關鍵的毒力因子。HP穿透粘液層在胃上皮細胞表麵定居，對胃上皮細胞和胃粘膜屏障等造成破壞作用，刺激上皮細胞增殖，改變增殖與凋亡的關係。VacA可使上皮細胞空泡樣變性﹑損傷﹑壞死及潰瘍，CagA本身無細胞毒性，但與VacA的轉錄等功能有關。另外，我國HP成人感染率已達60%～80%［5］,血清學檢查絕大部分均為陽性，因此，HP進行分型檢測特別重要，能及時指導臨床治療。本文通過免疫印跡法對227例患兒進行CagA、VacA、UreA、UreB抗體檢測，結果顯示：HP感染85例，陽性率為37.44%，略低於成人感染率［5］，而且HP感染率隨著年齡增加而增加，與文獻［1］報道基本一致。免疫印跡法是一種可靠的診斷HP感染的非入侵性方法,它的特異性和敏感性都較高且方法簡單,且能定性分析蛋白質各組分,與其它方法相比,具有操作簡單易行不需要昂貴的儀器,安全準確等優點,特別適合不適宜進行胃鏡檢查或不需要胃鏡檢查的患者,病人易於接受,及時指導臨床治療並且可用於流行病學調查。

【參考文獻】
  　　［1］ 胡伏蓮.幽門螺杆菌感染的流行病學［J］.（總97《中國醫刊》）,2007,42(2):17～18.

　　［2］ 王蔚虹,胡伏蓮.幽門螺杆菌的分子生物學［M］.北京:中國科學技術出版社,1997,170.

　　［3］ 王思平.幽門螺杆菌VacA基因致病機理及胃十二指腸疾病的關係［J］.國外醫學消化係統疾病分冊,1997,17(3):141.

　　［4］ 張尤力. 幽門螺杆菌VacA基因型和CagA基因及其表達產物［J］. 國外醫學消化係統疾病分冊,1997,17(3):141.

　　［5］ 蔣麗蓉,許幼如,張鳳富.胃腸病患者幽門螺杆菌感染若幹情況的研究［J］.中國內鏡雜誌,1998,4（1）:301.