一、實驗目的：
學習酵母菌種的純種分離技術
二、實驗原理：
關於純種分離，在基礎微生物學實驗中已學過稀釋分離法和劃線分離法，這裏不再重複。這兩種方法雖然簡單，但並不能保證分離所得種的純度。而單細胞分離法因可用顯微鏡直接檢查，其純度能得到充分保證。
林德奈單細胞分離法，即小滴培養法，是將酵母菌液充分稀釋至每一小滴差不多含一個酵母細胞，然後在顯微鏡下確證隻含一個細胞的小滴，經適當培養後，擴大保存。
三、實驗器材與試劑：
顯微鏡，凹載玻片，計數板，蓋玻片等。
四、實驗步驟：
1. 取2塊蓋玻片，用分析天平稱重（精確至0.1mg）後，在一塊蓋玻片（最好用血球計數板的蓋玻片）上用毛細滴管滴上9滴酵母培養基，合上另一玻片，再稱重，計算每滴培養基的體積。
2. 用計數板計數酵母菌，用培養基對其進行高倍稀釋，稀釋至每滴培養基中大致含一個酵母菌。
3. 在已滅菌的蓋玻片上滴上酵母稀釋液（每張玻片可滴9滴），放於已滅菌的凹載玻片上，顯微鏡下觀察，找到隻含一個酵母菌的小滴，做上記號。
4. 30℃培養一定時間後（應放於濕室中），用無菌濾紙片吸走標記的酵母菌，進行擴大培養和菌種保藏。
五、注意事項：因小滴易幹，操作時動作要快，培養時要用濕室。
六、思考題：稱重時為什麽要用兩塊蓋玻片？是否可以用微量移液器（如1微升）來代替稱重？
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