一、配製時的質量控製
（1）容器：配製和分裝培養基的燒瓶、平皿或試管等器材應為中性，無酸、堿抑製物殘留，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一，影響藥敏試驗結果。
（2）成分來源：各種成分來源可靠，不含對目的菌生長有抑製的物質。特殊要求的培養基，如葡萄糖氧化發酵試驗（O／F 試驗），除加入葡萄糖外，不能含有其他糖類，指示劑不能用乙醇溶液，避免O／F試驗的假陽性。培養基配製用水應是蒸餾水。
（3）pH值調整：根據培養基的不同要求調整pH 值，控製在要求範圍的±0.2之內。應當注意，培養基在高壓滅菌後其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時應比實際需要p H值高0.1～0.2。
（4）滅菌：根據培養基所含成分及配製數量的不同，選擇不同的滅菌方式，既要達到滅菌效果，又不破壞培養基成分。一般對穩定的培養基，如MH瓊脂、營養瓊脂可用高壓滅菌，即121℃15min ；而含糖的培養基則以108℃滅菌為好，以防止糖類破壞。不耐高熱的物質如血清、牛乳等，可采用間隙滅菌法滅菌。
（5）分裝：根據使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養基所用的平皿、試管要求清潔，不殘留酸堿；製備平板培養基時，操作台要水平，以避免瓊脂平板厚薄不一，同時確保無菌操作。
二、配製後質量控製
（1）培養基外觀情況：包括顏色、透明度、有無沉澱和凝固。如發現培養基表麵有裂紋或與培養皿的邊緣分離，說明培養基有脫水現象，必須丟棄。
（2）無菌試驗：每一批配好的培養基均須進行無菌試驗。先滅菌後分裝的培養基，可采用抽樣方法試驗，少於100個樣本通常選取5％～10％的量，如果配製大量培養基，則任意選取10 個培養基；無菌分裝培養基則需全部做無菌試驗。樣本在35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養，如培養基含有血液，則需再置於室溫1天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養基因含有抑製物質，能抑製許多微生物，因此，可加入10倍量的無菌液體培養基，稀釋抑製物質，以利於檢出汙染菌。即使做過無菌試驗，接種時，也要檢查每個平板上的可見菌落。
（3）性能測試：每一批新製或新購的培養基，使用前均須取已知性質的庫存菌種進行性能測試。培養基按目的不同可分為增菌培養基、分離培養基和鑒定培養基。
①增菌培養基：接種少量難以生長的細菌，在一定時間內觀察增菌情況，細菌能生長的最小接種濃度越小，說明增菌培養基性能愈好。
②分離培養基：要求目的菌生長良好，非目的菌被抑製。一般要求生長的目的菌接種量不可過多，較好的方法是將測試菌調成0．5麥氏濁度的菌懸液，再用0.001ml的標準接種環塗劃在培養基上，觀察菌落生長。
③鑒定培養基：應選擇具有典型特征的菌株作性能試驗。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸杆菌、福氏誌賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養基，若反應結果為斜麵產酸／高層產酸、硫化氫陽性，斜麵產堿／高層產酸，斜麵產堿／高層產堿，質量才算合格。
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