稀釋法
即最低(或最小)抑菌濃度( minimal inhibitory concentration, MIC)的測定。
1.基本原理在肉湯或瓊脂中將抗菌藥物進行一係列(對倍)稀釋後,定量接種待檢菌,35℃孵育24 h後觀察。待檢菌肉眼未見生長的最低藥物濃度,即為該藥物對待檢菌的最低抑菌濃度。
2 . 試驗方法 取無菌試管26 支,排成兩排。另取3 支試管,分別作為肉湯對照管、待檢菌生長對照管和質控菌生長對照管。每管加入M- H 肉湯2 ml,在第1 管加入經M- H 肉湯稀釋的藥物原液( 256 mg/ L)2 ml 混勻,然後吸取2 ml 至第2 管,混勻後再吸取2 ml 至第3 管。如此連續對倍稀釋至第13 管,並從第13管中吸取2 ml 棄去。此時各管含藥濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/ L 。第1 排試管每管加入待檢菌菌液(1 X 107 CFU/ ml0.1 ml ,第2 排試管每管加入標準菌菌液(1 X 107 CFU/ ml) 0.1 ml,最終接種菌量約為5 X 105 CFU/ ml 。置35℃培養箱孵育18~24 h,觀察有無細菌生長。
3. 結果判斷藥物最低濃度管無細菌生長者(對照管細菌生長良好) ,即為待檢菌的最低抑菌濃度( MIC)不計。
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