1、了解抗生素產生菌體外篩選法的原理。
2、學習並掌握抗生菌的鑒別方法。
原理
由土壤中分出的放線菌需進一步鑒別是否為需要的抗生菌。首先應根據篩選目的確定試驗模型，然後利用培養基平板進行拮抗性測定。常用的方法有瓊脂塊法和濾紙片法。其主要依據是擴散原理，即觀察在抗生菌周圍是否會出現明顯的抑菌圈。抑菌圈的大小和透明度則表明了該菌株抗菌活性的強弱。本實驗選用了這兩種方法。
儀器與材料
1、培養基：500ml三角瓶中分裝300ml黃豆餅粉瓊脂，18×180mm試管分裝
4ml黃豆餅粉浸汁，300ml三角瓶分裝150ml細菌培養基，150ml三角瓶分裝50ml馬鈴薯培養基。
2、試驗菌：
（1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
（2）大腸杆菌（Escherichia coli）
（3）金黃色葡萄球菌（Staphlococcus aureus）
（4）深紅酵母（Ruodotorula rubra）
3、待測菌株：
（1）瓊脂培養物：將融化的黃豆餅粉瓊脂倒入無菌培養皿，製成平板。用記號筆在平皿背麵畫一直線，將平皿一分為二，分別注明待測菌株的編號。並按照編號將待測菌株密集劃線接入平板。同法接入華美鏈黴菌（Streptomyces splendens）和金黴素鏈黴菌（Streptomyces aureofaciens）作為對照菌，28℃下培養7天。
（2）發酵液：將待測菌株和對照菌分別接入黃豆餅粉培養液，作好標記，28℃下振蕩培養7天。
4、滅菌物品：培養皿，打孔器，鑷子，圓濾紙片，15×150mm試管分裝5ml無菌水，1ml吸管，無菌漏鬥。
5、其它：接種用具，遊標卡尺，記號筆，搖床。
方法
一、瓊脂塊法
1、分別取枯草芽孢杆菌、大腸杆菌和金黃色葡萄球菌各1支，加入5ml無菌水製成菌懸液，備用。
2、取9套無菌培養皿，向每套培養皿中分別加入1ml試驗菌懸液，然後加入約12ml冷卻至45℃左右的細菌培養基，迅速在實驗台上搖勻，製成指示菌平板。每1種指示菌3個重複， 並注明指示菌及測定菌株的位置。
3、用無菌打孔器將待測菌株和對照菌的黃豆餅粉瓊脂培養物切塊，每種培養物9塊。
4、用無菌接種針，將待測菌株和對照菌瓊脂塊分別移入各指示菌平板的相應位置上，菌麵朝上，間隔均勻擺放。
5、靜置20min後，放入恒溫箱，37℃下培養18～24h。
6、用遊標卡尺測量抑菌圈直徑，並觀察抑菌圈的透明程度和邊緣整齊程度。
二、濾紙片法
1、向深紅酵母菌斜麵中加入5ml無菌水，製成菌懸液。
2、向已冷卻至45℃左右的馬鈴薯培養基中加入0.5ml深紅酵母菌懸液，搖勻後，倒3個指示菌平板，並在平皿背麵標明測定菌株的位置，備用。
3、過濾各測定菌株的發酵液。
4、用無菌鑷子取無菌的圓濾紙片，蘸取各測定菌株的發酵濾液，放入指示菌平板的相應位置上，每1測定菌株3個重複。
5、靜置20min後，28℃下培養2天。
6、用遊標卡尺測量抑菌圈直徑，並觀察抑菌圈的透明程度和邊緣整齊程度。
結果
將實驗所得結果填入下表，抑菌圈直徑以mm來表示
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