礦質元素、生長因子：微生物生長繁殖需要P、K、Na、S、Mg、Ca等主要礦質元素以及Fe、Cu等微量元素，因此培養基中常加入K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、NaCl、KCl、FeSO4等無機鹽類；生長因子主要是調節微生物代謝活動的B族維生素，常由酵母膏、肝浸出液等提供。許多天然成分的原料如牛肉膏、麥芽汁、玉米粉、豆芽汁等，含有各種無機元素和生長因子，不需另外添加。
培養基的製備方法
以下為常規方法，如配方中有特殊規定或要求，以配方為第一依據。
1.根據配方，計算各種營養成分用量。一般藥品可用普通藥物天平稱量，用量少的藥品，可按比例配成高濃度溶液，再按所需量用移液管吸取。稱好的藥品放入玻璃燒杯或搪瓷杯中。
2.在另一容器中將所需量的水(一般可用自來水，有特殊要求時需用蒸餾水)加熱，取全量的1/3左右倒入放藥品的容器中，用玻璃棒攪拌，待藥品全溶後，再將其餘熱水全部倒入。
3.若配製固體培養基，則稱取1.5～2％的瓊脂放入已溶化的營養液中，繼續加熱至瓊脂全部溶解。加熱中隨時攪拌，防止溢出或糊底。燒糊的培養基營養物質破壞，並產生有毒物質，不宜再用。
4.待溶化的培養基稍冷卻後，按配方要求調整pH值。先取10毫升培養基裝入試管中，用pH試紙測其自然pH，再用1％NaOH(或1％HCl)調至所需pH，根據用量計算，換用10％NaOH(或10％HCl)調整所配全量培養基的pH。加堿(或酸)溶液時，應邊滴加邊攪拌，至應加量將近用完時，再次測試，最後調至要求的pH值。
5.配好的培養基，根據需要趁熱分裝至試管或錐形瓶中。分裝需用漏鬥，以免瓊脂粘在管口或瓶口上。裝瓶量一般為瓶容量的1/3～1/2；裝試管一般為試管高度的1/5～1/4，以免滅菌時培養基上溢，粘濕棉塞。
6.用預先製好的棉塞塞住管口或瓶口。棉塞既有利於通氣，又有濾菌作用，故鬆緊、大小應適當，以免使用時影響操作(如圖)。
最後用牛皮紙或報紙包住棉塞，紮緊在瓶頸或試管上方，以免滅菌時水蒸汽沾濕棉塞或脫落。
7.滅菌後取出的固體培養基，根據需要可將試管立即斜放，冷凝後即成斜麵培養基，用於菌種擴大培養及保藏；錐形瓶中的培養基，倒入無菌培養皿中，冷凝後即製成平板培養基，可用於菌種的分離、鑒定等。液體培養基冷卻後可直接根據需要接入菌種。
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