葡萄球菌凝固酶和凝聚因子試驗

    葡萄球菌凝固酶試驗被廣泛地用於常規鑒定金黃色葡萄球菌與其他葡萄球菌。試管法凝固酶試驗稱為葡萄球菌凝固酶，玻片法為檢測凝聚因子。

1．凝聚因子試驗：

    取1滴蒸餾水於潔淨的玻片上，用接種環挑取待檢菌一環置於蒸餾水中，製成濃的菌懸液，無自凝現象。然後加一環家兔血漿混合，10s內觀察結果，出現明顯細菌凝塊為陽性，否則為陰性。如超過 10s可出現假陽性，有10％一15％金黃色葡萄球菌呈假陰性，因此必須用試管法驗證凝聚因子試驗。

    操作過程中的注意點：
    10s內觀察結果。
    必須製備濃厚的均勻菌懸液。
    用EDTA抗凝的兔血漿為最好。
    加血漿後不要再混攪，以免細菌凝塊分散變小。
    生長在高鹽培養基上的菌落可出現自凝或假陽性。

2．葡萄球菌凝固酶試驗：

    用生理鹽水將血漿4倍稀釋，取0.5ml。然後挑取3～5個菌落於稀釋血漿中，成濃菌懸液。置37℃水浴，3～4h後讀取結果，凝固者為陽性。若陰性，繼續觀察到24h，不凝固者為陰性。試驗應同時作陽性、陰性對照。
    試管法葡萄球菌凝固酶試驗陽性者，應見到明顯的纖維蛋白凝膠塊，出現羊毛狀或纖維狀沉澱物並非真正凝固，應判為陰性。中間型葡萄球菌、豬葡萄球菌需要較長時間孵育，才可出現陽性。

    凝固酶試驗應考慮下述情況：
    某些金黃色葡萄球菌產生溶纖維蛋白酶，溶解纖維蛋白凝塊。
    所用血漿缺乏纖維蛋白原。
    試驗菌株不純。

 

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