（一）實驗目的：學習自製水浸片觀察黴菌的形態
（二）實驗原理：黴菌的營養體是分枝的絲狀體。其個體比細菌和放線菌大得多，分為基內菌絲和氣生菌絲。氣生菌絲中又可分化出繁殖絲。不同黴菌的繁殖菌絲可以形成不同的孢子。
黴菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以製標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液。此染色液製成的黴菌標本片的特點是：細胞不變形，具有殺菌防腐作用，且不易幹燥，能保持較長時間，溶液本身呈藍色，有一定染色效果。
利用培養在玻璃紙上的黴菌作為觀察材料，可以得到清晰、完整、保持自然狀態的黴菌形態；也可以直接挑取生長在平板中的黴菌菌體製水浸片觀察。
（三）實驗器材
1.活材料：在馬鈴薯瓊脂平板上或用玻璃紙透析培養法培養3—4天的根黴（Rhizpus sp.）、青黴（Penicillum sp.）、曲黴（Aspergillus sp.）；
2.染色液和試劑：乳酸石炭酸棉藍染色液（附錄二、（一）、10）、50%酒精（V/V）。
3.器材：剪刀、鑷子、載玻片、蓋玻片、解剖針、顯微鏡。
（四）實驗方法
1.製水浸製片觀察法 在載玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉藍染色液或蒸餾水，用解剖針從生長有黴菌的平板中挑取少量帶有孢子的黴菌菌絲，用50%的乙醇浸潤，再用蒸餾水將浸過的菌絲洗一下，然後放入載玻片上的液滴中，仔細地用解剖針將菌絲分散開來。蓋上蓋玻片（勿使產生氣泡，且不要再移動蓋玻片），先用低倍鏡，必要時轉換高倍鏡鏡檢並記錄觀察結果。
2.玻璃紙透析培養觀察法
（1）玻璃紙的選擇與處理 要選擇能夠允許營養物質透過的玻璃紙。也可收集商品包裝用的玻璃紙，加水煮沸，然後用冷水衝洗。經此處理後的玻璃紙若變硬，必定是不可用的，隻有那些軟的可用。將那些可用的玻璃紙剪成適當大小，用水浸濕後，夾於舊報紙中，然後一起放入平皿內121℃滅菌30min備用。
（2）菌種的培養 按無菌操作法，倒平板，冷凝後用滅菌的鑷子夾取無菌玻璃紙貼附於平板上，再用接種環沾取少許黴菌孢子，在玻璃紙上方輕輕抖落於紙上。然後將平板置28—30℃下培養3—5天，曲黴菌和青黴菌即可在玻璃紙上長出單個菌落（根黴菌的氣生性強，形成的菌落鋪滿整個平板）。
（3）製片與觀察 剪取玻璃紙透析法培養3—4天後長有菌絲和孢子的玻璃紙一小塊，先放在50%乙醇中浸一下，洗掉脫落下來的孢子，並趕走菌體上的氣泡，然後正麵向上貼附於幹淨載玻片上，滴加1—2滴乳酸石炭酸棉藍液，小心地蓋上蓋玻片（注意不要產生氣泡），且不要移動蓋玻片，以免搞亂菌絲。
標本片製好後，先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡。注意觀察菌絲有無隔膜，有無假根、足細胞等特殊形態的菌絲。注意其無性繁殖器官的形狀和構造，孢子著生的方式和孢子的形態、大小等。
（五）實驗作業：
給出根黴、青黴、曲黴的個體形態圖，並注明各部位名稱。
下一篇：高溫對酵母細胞的影響
