[摘 要] 目的 評定鮮牛奶菌落總數檢驗結果的不確定度。方法 采用統計學方法對鮮牛奶菌落總數的日常檢驗結果進行不確定度評定。結果 本實驗室鮮牛奶菌落總數檢驗結果的擴展不確定度為 0.0594。結論 利用鮮牛奶菌落總數日常檢驗結果評定其測量不確定度是可行的。
關鍵詞：鮮牛奶 菌落總數 不確定度評定
本實驗室作為供港鮮牛奶的檢驗檢疫實驗室，日常檢驗鮮牛奶頻率非常高(每周 3批)，所以鮮牛奶生產企業和本實驗室對供港鮮牛奶的衛生質量狀況都非常敏感的。菌落總數的測定是用來判定食物被細菌汙染的程度及衛生質量，它反映食品在生產過程中是否符合衛生要求，以便對被檢樣品做出適當的衛生學評價。菌落總數的多少在一定程度上標誌著食品衛生質量的優劣①。故此對供港鮮牛奶批批進行菌落總數檢測成為監控鮮牛奶衛生質量狀況的重要措施之一。一切測量結果都不可避免地具有不確定度②。為使鮮牛奶微生物指標的檢驗結果更加客觀準確，有必要對鮮牛奶菌落總數檢驗結果進行不確定度的評定。
1 JJF1059-1999《測量不確定度評定與表示》中有關術語及其概念。
1.1[測量]不確定度
表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量結果相聯係的參數 。
1.2標準不確定度
以標準差表示的測量不確定度。
1.3合成標準不確定度
當測量結果是由若幹個其他量的值求得時，按其他各量的方差或(和)協方差算得的標準不確定度。
1.4擴展不確定度
確定測量結果區間的量。合理賦予被測量之值分布的大部分可望含於此區間。
1.5包含因子
為求得擴展不確定度，對合成標準不確定度所乘之數字因子。
1.6 自由度
在方差的計算中，和的項數減去對和的限製數。在重複條件下。對被測量作 n次獨立測量時。自由度 v=n-1
1.7置信概率
與置信區間或統計包含區間有關的概率值。經常用百分數表示。
1.8不確定度的A類評定
用對觀測列進行統計分析的方法，來評定標準不確定度。
1.9不確定度的 B類評定
用不同於對觀測列進行統計分析的方法，來評定標準不確定度。
2評定方法的選擇
鮮牛奶菌落總數檢測步驟主要包括：樣品稱量、稀釋、培養、菌落計數及結果修約等，其不確定度主要來自重複性 (測試環境、樣品的均勻性、取樣的重複性、培養時間、培養溫度、修約、計數)，培養條件 (培養時間允差、培養溫度的允差)， 取樣 (取樣體積、製樣均勻度、樣品稀釋)等。
檢測所得的數據發散性較大。故此我們隻考慮由檢測結果發散性引入的不確定度。另外在微生物檢測結果和影響因素之間難以建立確定的函數關係。不可以像物理化學測量那樣從計量學上進行嚴密的評估。所以我們在此采用統計學的方法 (A類評定)來評定鮮牛奶菌落總數檢測的不確定度。
建立數學模型：設菌落總數為 Y，試驗結果為 X，則：Y=X個/ml，最佳值
3檢驗方法
鮮牛奶菌落總數的檢驗按照國家標準GB／T4789.2-2003《食品衛生微生物學檢驗菌落總數測定》規定的檢測程序進行3。
4不確定度評定
A類評定方法是應用貝塞爾公式對一組樣品的檢測數據合並樣品平方差來進行評定。由於樣品檢測結果發散性較大，直接根據檢測結果平均值計算標準偏差已經不合適，可以采用將檢測結果取對數，計算對數平均值的標準差④。再通過求反對數的方法得到每份樣品菌落總數的取值範圍。
收集一段時間裏同一實驗人員、同一檢測環境下對 20份鮮牛奶菌落總數檢測所得的數據 (每份樣品作兩個平行樣，得到40個檢測數據)，具體數據見表一。
計算過程如下：
①共測量 20個樣品，每個樣品測量兩次，列出第j個樣品的兩次測量結果X1j和X2j
②分別對X1j和X2j 取對數，得lgX 1j和 lgX2j並計算它們的平均值lgxj
③計算每一份樣品分別計算其殘差平方和∑
④由各樣品的殘差平方和計算20個樣品的合並樣本標準差
⑤ 每個樣品測量兩次，故兩次測量平均值的標準不確定度為
⑥根據置信概率p=95％，自由度 v=20-1=19，查 t分布表，得包含因子k=2.093，於是擴展不確定度
⑦擴展不確定度範圍以區間形式表示：
⑧計算每一樣品lgXj的取值範圍，再分別取反對數得到每一樣品菌落總數 Xj的取值範圍
鮮牛奶菌落總數不確定度評定數據表 (表一)略
5結束語
在本實驗室利用日常鮮牛奶菌落總數檢驗結果來評定其測量不確定度是簡單可行的，對於其他食品樣品的菌落總數檢測，可采用本例的評定模式來進行不確定度評定。
測量不確定度是測量技術的重要概念，是衡量測試結果的準確性和可靠性的重要參數。
作為 CNAS認可實驗室，為了符合CNAS對檢驗實驗室以及實驗檢測人員關於不確定度評估的要求⑤，實驗室應該嚴格製定不確定度的評估程序，並對日常檢測結果進行不確定度的評定，避免各方因測量條件的不同對測量結果引起爭議，有效地降低檢測風險和提高工作效益。
作者：鍾敏賢
作者單位：肇慶出入境檢驗檢疫局 526060
參考文獻
[1]出口產品電子監管生產企業實驗室及質量管理和檢測技術人員認可培訓叢書，食品篇．
[2]JJF 1 059-1 999 《測量不確定度評定與表示》．
[3]GB／T 4789．2-2003《食品衛生微生物學檢驗 菌落總數測定))．
[4]TELARC，“Estimation of Uncertainty of Measurement in Microbiological Analyses” Examples of Estimation of Uncertainty of Measurement in Tests Based on the ISO／TAG4 Approch，Hong Kong ILAC，1994．
[5]CNAS—CL07：2006測量不確定度評估和報告通用要求．
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