3 結果
3.1 微生物發酵對溪黃草抑製細菌生長的影響從表1可知溪黃草對白葡萄球菌的抑製作用比對大腸杆菌的抑製作用明顯。表1 發酵溪黃草的抑菌效果（略）
經枯草杆菌發酵和未經枯草杆菌發酵的溪黃草醇提物對細菌都具有一定的抑製作用，其中經枯草杆菌發酵後溪黃草的抑菌效果反而降低。表2結果發現發酵過程中枯草杆菌的生長會受到溪黃草的抑製，另外用溪黃草提取物直接進行平板試驗，對枯草杆菌的抑菌直徑為5.50 mm，也證實溪黃草對枯草杆菌生長的抑製。但不添加其他營養（I）時枯草杆菌仍然生長，證明枯草杆菌能利用溪黃草成分。枯草杆菌發酵會降低溪黃草的抑菌效果，可能是由於枯草杆菌在發酵過程中分解利用了抑菌有效成分或使抑菌有效成分降解。表2 微生物發酵後的菌落數（略）
從表1可以看出，酵母菌發酵後溪黃草的抑菌效果大大加強，但與乳酸菌不同，酵母菌本身不含抑菌物質，因此發酵後其抑菌物質仍來源於溪黃草。溪黃草對酵母菌生長的抑製作用也比對大腸杆菌和白葡萄球菌的抑製作用強（d＝6.29 mm），因此不論有沒有添加培養基，酵母在含溪黃草中培養時基本不增長，但發酵前後可以檢測出活酵母菌，說明了在發酵過程中，酵母菌能生長。根據上述結果，認為經酵母菌發酵後溪黃草的抑菌效果增強的主要原因是由於酵母菌存在使溪黃草提取物中抑菌有效成分增加。
3.2 微生物發酵對溪黃草抑製黴菌生長的影響經枯草杆菌、乳酸菌和酵母菌發酵的溪黃草醇提物作用於黑曲黴和青黴菌都沒有產生明顯的抑菌圈，這和其他文獻報道的溪黃草的醇提物對黴菌抑製效果不明顯［2］相一致。
經乳酸菌發酵（包括乳酸芽孢杆菌和美樂多乳酸菌）的溪黃草醇提物對照組Ⅲ和Ⅴ在平板培養後，黴菌的生長不鋪過濾紙片，而其他在平板培養後有少量的黴菌在濾紙片上生長，說明乳酸菌醇提物對黴菌也有一定抑菌效果。
利用酵母菌發酵的Ⅴ在培養後黴菌鋪過了濾紙片生長，Ⅱ和Ⅳ培養後有少量的黴菌在濾紙片上生長，而Ⅰ和Ⅲ培養後黴菌的生長並不鋪過濾紙片，這可能同樣是酵母菌發酵過程使溪黃草提取物抑菌有效成分濃度更高，使其抑製作用更強。
3.3 纖維素酶處理對溪黃草抑菌作用的影響實驗發現溪黃草醇提前先經過纖維素酶處理，其抑製細菌作用較未經酶處理的溪黃草醇提物有較大增強（表3）。當纖維素酶用量增加，溪黃草的醇提物的抑菌作用也隨之增強。表3 纖維素酶處理後溪黃草的抑菌效果（略）
實驗發現經纖維素酶處理的溪黃草的醇提物對於黴菌（包括黑曲酶和青黴菌）都無明顯抑製作用，但是經纖維素酶處理後的溪黃草醇提物，黴菌不覆蓋濾紙片生長，而溪黃草的原藥醇提物則有少量的黴菌在濾紙片上生長。
添加纖維素酶對溪黃草進行預處理後，纖維素酶起到了破壁作用使得溪黃草的抑菌有效成分能夠更容易地溶於乙醇中，從而增強了抑菌效果,這與其他應用纖維素酶提取中藥時的效果一致［8，9］。根據結果，進一步推斷上述酵母發酵溪黃草使其抑菌作用大大增強是由於酵母起到了破壁作用，使抑菌成分含量增加，同時酵母不會破壞抑菌成分。
纖維素酶是可以由真菌和細菌等微生物在特定的條件下產生，那麽利用微生物直接處理中藥就可以起到破壁的作用，在大生產中可以降低原料的成本和簡化操作。
4 結論
實驗結果證實溪黃草對於細菌的抑製效果比較明顯，對黴菌有一定的抑製效果。實驗結果顯示枯草杆菌和乳酸菌不能提高溪黃草抑菌效果，反而會使其抑菌效果下降；酵母菌發酵溪黃草可使其抑菌作用得到明顯提高，與用纖維素酶處理效果相似，證明利用合適菌種發酵提高藥材有效成分的利用率是可行的。同時，通過試驗證實中藥材可以為某些菌的生長提供必要的物質，可用於開發利用藥渣，充分利用藥材資源。
作者：劉誌偉 盧彩煥 張晨
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