【關鍵詞】 實驗室技術和方法；質量控製；管理製度
Quantity Control Analyze of Examination Analysis in Member Microbe Room
Key words:Laboratory technique and method; Quantity control;Manage system
隨著檢驗醫學的迅速發展，檢測技術也在不斷提高，各大醫院都給分子微生物實驗室配備了最先進、精密度、準確度最好的全自動熒光定量分析儀。我院從2000年開始配備了由美國PE公司生產的全自動熒光定量分析儀，是由我院的性質決定的。我院為傳染病專科醫院，工作量大，要求時間短，為確保所測項的準確性而配備的，同時要求分子微生物室操作人員必須經過嚴格的培訓後持有上崗證，才能進行此項操作。此外檢驗人員還要不斷學習新技術，掌握新知識，了解檢驗醫學的新動向，在檢測過程中要嚴格遵守操作規程，提高檢驗技術水平，防止標本間的交叉汙染，以及擴增產物的汙染等就顯得十分重要，這是做好試驗的關鍵所在。在分析過程中為確保報告單的準確性可分為3個環節：分析前、分析中、分析後，其中哪一個環節都不能忽視。現將整個環節進行解析如下。
1 加強分析前的質量管理
1.1 采血器械的標準化 長期以來由於采血器械沒有統一的標準，使用存在的不少問題，如軟質塑料試管采血，由於汙染問題的存在可造成結果不準確，這樣大夫在診斷和治療以及用藥方麵帶來了很多不便，也不可避免的造成了假陽性結果(對乙肝DNA而言)，或者是假陰性結果(對丙肝RNA而言)。近年來，我科使用真空采血係統，這樣就減少了醫務人員在采血過程中的交叉感染，同時也減少了體外溶血的發生而造成的檢驗結果的誤差。
1.2 按規定時間進行 采血一般建議患者早晨空腹采血，因乳糜血會影響結果的準確性，使結果偏低。在疾病發展過程中，標本的采集過早或過晚都可能會給出假陰性結果。
1.3 防止標本采血不當造成溶血 標本溶血對RNA的測定有較大影響，如果標本溶血，血細胞破裂會有大量RNAse釋放而使提取核酸的模板RNA降解。溶血多由於采血步驟不規範、技術不熟練而造成，如抽血不順利、抽血時壓力過大等。
1.4 標本送檢要及時 采集後的標本應及時送檢，由於分子微生物實驗室對標本要求比較嚴格，比如HCVRNA的檢測要求標本送檢後必須在2 h內分離出血清，如短時間(1周~2周)保存在-20 ℃，長時間保存應在-70 ℃以下。
1.5 標本確認和申請單的核對 住院和門診患者都要檢查姓名、年齡、開單時間、接標時間、檢測項目等逐一進行登記，以免發生標本錯誤。標本在分離轉移時要避免發生錯誤和交叉汙染，標本若發生溶血、脂血等應拒收，然後填寫拒收報告單。
2 注重分析中的質量管理
2.1 儀器的維護 全自動熒光定量分析儀(PCR儀)屬於精密電子儀器，應當在15 ℃~25 ℃之間運行。室溫太高或太低都會引起儀器內的程控芯片和其他元件不正常工作。除此之外，要注意室內的濕度，保持室內衛生，避免陽光直射，最好專人使用、維護和保養，PCR儀應定期用電子測溫儀校準溫度。
2.2 試劑的準備 所測項目應嚴格按照試劑盒說明書來進行，分析過程中每加一步試劑都必須認真仔細防止試劑被汙染，注意更換吸頭，所有操作過程一律都在生物安全櫃內進行。試劑一般根據標本用量來進行配製，避免反複凍融。
2.3 分析過程中質量控製 分子微生物實驗室的質量控製主要由室間質控、室內質控來評價，室間主要反映實驗室結果的準確性及可比性，室內主要反映實驗室的精密度。除此之外，質控物的複溶和保管也是重要的。在發報告單之前要對所測質控值進行分析，看是否在控，如不在控要分析原因，采取糾正措施。
3 重視分析後的管理
3.1 管理體係 我院采用微機錄入、微機采集、微機審核的管理體係，每份報告結果均由檢測者和審核者檢查審核後才能發出。在審核過程中對結果有可疑時應進行複查，並通知大夫第2天再報結果。標本檢測完後，我室將原標本和血清標本一起保存14 d，以免有疑義時進行複查。
3.2 結果分析和解釋 測定結果與臨床診斷不符要進行複查、要及時和臨床醫生溝通。由於PCR試驗受多種因素的影響，應做好解釋工作。如果在檢測中出現免疫標誌與分子生物學標誌發生矛盾時，應結合臨床的全麵情況作出合理的解釋。
［1］ 衛生部臨床檢驗中心.98全國臨床化學室間質評總結大會專題報告集［R］.1998，11.
［2］ 李影林.中華醫學檢驗全書［M］.北京：人民衛生出版社，1996，8(9).
［3］ 劉克莉，方宏罡，趙士平.中國誤診學雜誌，2006，6(1)：170171.
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