2 結果與分析
2.1 乳酸菌分離與純化的結果
酸奶稀釋塗布平板培養48 h後,在 BCG牛乳培養基上有很多黃色菌落,菌落周圍培養基變為黃色,此即為嗜熱鏈球菌疑似菌落。菌落特征為:黃色、扁平、邊緣不整齊、菌落平均大小為1.37mm。取具有上述特征的菌落進行進一步劃線分離,最終獲得純化菌株,編號為M1。
2.2 M1的革蘭氏染色結果及形態觀察
M1菌體革蘭氏染色為藍紫色,革蘭氏陽性。菌體球形或卵圓形,排列成對或形成長短不等的鏈狀。
2.3發酵產物紙層析實驗結果
將M1接種到乳酸菌葡萄糖發酵培養基,40℃培養48h後,培養基由紫色變成黃色,德拉姆氏小管不產氣,取產酸不產氣的液體發酵液點樣做紙層析。同時點樣空白發酵液和2% 乳酸做對照。實驗結果見表 1 .
表 1 M1 菌株葡萄糖發酵液紙層析實驗結果
點樣項目 |
基線到顯色圈中心距離(cm) |
基線到溶劑前沿距離(cm) |
Rf |
M1菌株葡萄糖發酵液 |
18.1 |
—— |
0.69 |
空白發酵液 |
—— |
26.4 |
—— |
由表 1可知,M1菌株葡萄糖發酵液遷移率 Rf =0.69,2%標準乳酸遷移率 R f=0.69,二者遷移率一致,說明發酵產物中有乳酸。結合革蘭氏染色及菌體形態觀察結果,確定M1菌株為嗜熱乳酸鏈球菌。
2.4 M1菌株牛奶發酵結果
將活化的M1菌株接入滅菌的牛乳培養基中進行牛奶發酵,冷藏24h後進行風味品評,實驗 結果見表 2 .
表 2 嗜熱乳酸鏈球菌發酵的酸奶品評結果
接種菌株 |
凝乳時間 |
凝乳情況 |
口感和香味 |
異味 |
pH值 |
M1 |
4.6h |
凝乳均勻,少量乳清析出 |
較好、脂香味濃 |
無 |
5.2 |
由實驗結果可知,M1菌株的凝乳時間較短,酸奶具有較好的口感和特有的脂香味,但其酸味不足。在實際生產中,嗜熱乳酸鏈球菌的主要作用是生成脂香味物質,該菌株具有良好的產生脂香味物質的能力,可以和保加利亞乳杆菌混合發酵生產酸奶.
3 結論
( 1 ) 利用BCG牛乳培養基為分離培養基,采用塗布稀釋分離的方法,從酸奶中成功分離出嗜熱乳酸鏈球菌。因在BCG牛乳培養基中有溴甲酚紫( 一種酸堿指示劑) ,因而其在BCG牛乳培養基上的菌落顏色為黃色,很容易與不產酸的雜菌分開,提高了分離效率。利用該方法分離嗜熱鏈球菌,菌落較大、菌落容易觀察,極大地提高了分離效率.
( 2 ) 采用常規的革蘭氏染色、形態觀察和發酵產物紙層析實驗相結合的方法對分離到的菌株進行簡單鑒定,該方法操作簡單、快速、實驗結果可靠.
( 3 ) 分離到的嗜熱乳酸鏈球菌菌株經活化後可以應用到生產中.
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