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食源性致病菌檢測技術(13)



錄入時間:2011-9-2 9:54:38 來源:食品夥伴網

  副溶血性弧菌

    副溶血性弧菌根據菌體O抗原不同,現已有13個血清群。主要引起食物中毒。副溶血性弧菌進入人體後會在消化道內迅速繁殖生長,產生大量的腸毒素。患者會出現劇烈腹痛、腹瀉、嘔吐和發熱,大多數患者會中度脫水。如果搶救不及時,患者會因為嚴重脫水而有生命危險。 

1.常規分離鑒定技術

    分離、鑒定:糞便、肛拭、嘔吐物、可疑中毒食物及相關的容器塗拭物等,采用直接分離與增菌分離進行檢測。檢測方法參照何曉青(1991年)專著進行。副溶血性弧菌選擇性平板采用科瑪嘉顯色平板,其菌落特征較典型。副溶血性弧菌的定量監測方法。可參照以最大可有數(MPN)方法進行測定。

    副溶血性弧菌鑒定方法包括生化鑒定、小鼠毒力試驗、神奈川(KP)試驗,KP很可能就是致病菌株。耐熱溶血素檢測,參照GB/T47897-2003FDA等檢驗方法,通過以上鑒定技術,確定副溶血性弧菌及其毒力情況。  

    PCR檢測技術應用:副溶血性弧菌的耐熱溶血素及耐熱相關溶血素基因通過PCR擴增,在食源性疾病相關標本中直接檢測毒力基因,該方法具有快速簡便的特點,為食源性疾病的快速診斷提高有效的依據。檢測副溶血性弧菌特有的基因片段(Pr72H)的方法,也可進行鑒定是否為副溶血性弧菌。  

    血清抗體檢測:取急性及恢複期雙份血清做間接凝血試驗:取急性及恢複期雙份血清做間接凝血試驗,抗體效價呈4倍或以上增長,即可確診。副溶血性弧菌抗體產生較早,一周之內可有明顯升高,以後迅速下降。  

2.流行病學分型技術

    血清分型技術:副溶血性弧菌可分為13個血清群及67K抗原因子血清型。菌體須以121高壓滅菌1小時後進行凝集試驗,近年來副溶血性弧菌流行的血清型以O3K6為多見。  

    分子流行病分型技術:目前在副溶血性弧菌分子流行病學采用的方法有:PFGE、多重PCR、核酸體分型以及隨機擴增多態性核糖核酸技術(RAPD)等。

 

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