一、在組織培養中汙染來源
1. 植物本身具有:
(1)植物病原菌
有些作物的病害已被透徹研究,因此在大量繁殖時,可立即檢查出來,但有些則否,造成若有汙染時,不知來源為何。
(2)和植物有關的菌類
有修植物本身便會和一些菌種共生,或是寄生於植物內部。
2. 植物所帶入的汙染:內在汙染源
許多植物表麵或大氣中生存的微生物,可經由植物自然的開口或傷口進如植物內部,而有一些兼性腐生菌或絕對寄生菌,可藉由載體或是擁有一些侵入的機製侵入植物內部,依其存在的地方分為
1. 細胞內-inter
2. 細胞間隙-interacellular
種類有:virus病毒、viroids類病毒、prokarytoes原核生物、fungi真菌、柔膜綱(ex:mite)、立克次體。
3. 操作室:外在汙染源
在組織大量培養下,除了植物本身外,大部分最有可能的汙染來源便是來自操作室。依其可能原因分析為:
(1)空氣
在操作室中,未過濾空氣帶有大量的微生物,隨者操作人員或植株接觸時,而汙染培養皿。故在國外對於操作室內空氣的清潔度分為四種等級:
ClassⅠ.沒有容易培養的微生物,和作物之主要病原菌
Ⅱ.沒有容易培養的微生物,和作物特殊病原菌
Ⅲ.沒有容易培養的微生物
Ⅳ.未做檢測
(2)不完全的滅菌設備或技術
因為使用滅菌不完全的設備或是技術,而導致植株或培養皿的汙染,例如:有些酵母菌,可避免酒精消毒,還有一些會產生內孢子,而避免火焰消毒。
(3)人員
在整個操作室內,人員可說是最大的帶菌者,其不管在毛發或是衣服等,都隱藏屬不清的菌。在進入操作室前,最好能將作業人員清潔處理,然後換上脫鞋,或是將塵土去掉。
(4)細縫的存在
因為若操作室有細縫的存在,則造成外果氣體直接流入,使得空氣中菌數增加。
(5)操作台上的濾網不幹淨
因為使用過久,或不當保養,而造成濾網壞掉,而產生更多的汙染。
(6)蹣及薊馬的存在
此為珠形網,具有活動能力,能到處跑來跑去。因此常造成散亂的汙染。
4.栽培過程汙染
在栽培室,組培瓶外和外界氣體交換時,亦會有汙染進入。汙染機率取決於空氣中帶菌密度與組培瓶空氣交換率。
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