實驗室組成
(一)基本實驗室
基本實驗室包括準備室、洗滌滅菌室、無菌操作室、培養室、緩衝間,是組織培養實驗所必須具備的基本條件。如進行工廠化生產,年產4萬-20萬,需3-4間實驗用房,總麵積
1、準備室(化學實驗室)
功能:又叫化學實驗室,進行一切與實驗有關的準備工作:完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養基配製與分裝、培養基和培養器皿的滅菌、培養材料的預處理等。
要求:最好有
分類:
分體式-研究性質實驗室,分開的若幹房間將準備室分解為藥品貯藏室、培養基配製與洗滌室和滅菌室等,功能明確,便於管理,但不適於大規模生產。
通間式-規模化實驗室,準備室一般設計成大的通間,使試驗操作的各個環節在同一房間內按程序完成。準備試驗的過程在同一空間進行,便於程序化操作與管理,試驗中減少各環節間的銜接時間,從而提高工作效率。此外還便於培養基配製、分裝和滅菌的自動化操作程序設計,從而減少規模化生產的人工勞動,更便 於無菌條件的控製和標準化操作體係的建立。
設備:準備室應具備實驗台、藥品櫃、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配製用玻璃儀器等。
2、洗滌滅菌室
功能:完成各種器具的洗滌、幹燥、保存、培養基的滅菌等。
要求:洗滌滅菌室根據工作量的大小決定其大小,一般麵積控製在30
設備:水池、落水架、中央實驗台、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、幹燥滅菌器(如烘箱)等。
3、無菌操作室(接種室)
功能:也叫接種室,主要用於植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的製備以及一切需要進行無菌操作的技術程序,是植物離體培養研究或生產中最關鍵的一步。
要求:接種室宜小不宜大,一般7~8平米(10-20平米)即可,其規模根據實驗需要和環境控製的難易程度而 定。要求封閉性好,幹爽安靜,清潔明亮,能較長時間保持無菌,因此不易設在容易受潮的地方;地麵、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易於清潔和消毒;配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動;為便於消毒處理,地麵及內牆壁都應采用防水和耐腐蝕材料;為了保持清潔,無菌室應防止空氣對流。接種室要求在適當位置吊裝 1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調,使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。
一般新建實驗室的無菌室在使用之前應進行滅菌處理,處理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸,並需定期滅菌處理,還可用紫外線照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。
設備:紫外燈、空調、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實驗台、和擱架,還有超淨工作台和整套滅菌接種儀器、藥品等。
4、培養室
功能:對接種到培養瓶等器皿中的植物離體材料進行控製條件下的培養,無論是研究性實驗室還是生產性實驗材料進行培養的場所。要求:約需 10
研究用實驗室,通常可根據光照時間設置成長日照、中日照、短日照培養室,也可以根據溫度設置成高溫和低溫培養室,每一個培養室的空間不宜過大,便於對條件的均勻控製。進行精細培養類型如細胞培養和原生質體培養,可采用光照培養箱或人工氣候箱代替培養室。
為了控製培養室的溫度和光照時間及其強度,培養室的房間不要窗戶,但應當留一個通氣窗,並安上排氣扇。室內溫度由空調控製,光照由日光燈控製。天花板和內牆最好用塑料鋼板裝修,地麵用水磨石或瓷磚鋪設,一般要分兩間,一為光照培養室,一為暗培養室。培養室外應有一預備間或走廊。
培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬製成,一般設5層,最低一層離地高約lOcm,其他每層間隔
培養室最重要的因子是溫度,一般保持在20—
室內濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器。控製光照時間可安裝定時開關鍾,一般需要每天光照10-16h,也有的需要連續照明。短日照植物需要短日照條件,長日照植物需要長日照條件。現代組培實驗室大多設計為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。
設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、轉床、自動控時器、紫外燈、光照培養箱或人工氣候箱、生化培養箱、邊台實驗台用於拍攝培養物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調等。
5、緩衝間
功能:是進入無菌室前的一個緩衝場地,減少人體從外界帶入的塵埃等汙染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養室。進入無菌操作室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。
要求:緩衝間需3
設備:1-2盞紫外燈、水槽、實驗台、鞋帽架、櫃子、滅菌後的工作服、拖鞋、口罩。
(二)輔助實驗室
根據研究或生產的需要而配套設置的專門實驗室,主要用於細胞學觀察和生理生化分析等。
1、細胞學實驗室
功能:用於對培養物的觀察分析與培養物的計數,對培養材料進行細胞學鑒定和研究,由製片室和顯微觀察室組成。製片是獲取顯微觀察數據的基礎,配備有切片機、磨刀機、溫箱及樣品處理和切片染色的設備。應有通風櫥和廢液處理設施。顯微觀察室主要是顯微鏡和圖像拍攝、處理設備。
要求:明亮、清潔、幹燥、防止潮濕和灰塵汙染。
設備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。
2、生化分析實驗室
功能:培養細胞產物為主要目的的實驗室,應建立相應的分析化驗實驗室,隨時對培養物成分進行取樣檢查。大型次生代謝物生產,還需有效分離實驗室。
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