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細菌的生物化學試驗(二)



錄入時間:2011-8-12 15:32:25 來源:生物在線

2.葡萄糖代謝類型鑒別試驗
(1)原理:細菌在分解葡萄糖的過程中,必須有分子氧參加的,稱為氧化型;能進行無氧降解的為發酵型;不分解葡萄糖的細菌為產堿型。發酵型細菌無論在有氧或無氧環境中都能分解葡萄糖,而氧化型細菌在無氧環境中則不能分解葡萄糖。本試驗又稱氧化發酵(O/F或Hugh-Leifson,HL)試驗,可用於區別細菌的代謝類型。
(2)方法:挑取少許純培養物(不要從選擇性平板中挑取)接種2支HL培養管中,在其中一管加入高度至少為0.5cm的無菌液體石蠟以隔絕空氣(作為密封管),另一管不加(作為開放管)。置35℃孵箱孵育48h以上。
(3)結果: 兩管培養基均不產酸(顏色不變)為陰性;兩管都產酸(變黃)為發酵型;加液體石蠟管不產酸,不加液體石蠟管產酸為氧化型。
(4)應用:主要用於腸杆菌科與其它非發酵菌的鑒別。腸杆菌科、弧菌科細菌為發酵型,非發酵菌為氧化型或產堿型。也可用於鑒別葡萄球菌(發酵型)與微球菌(氧化型)。
3.甲基紅(MR)試驗
(1)原理:某些細菌在糖代謝過程中,分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸進一步被分解為甲酸、乙酸和琥珀酸等,使培養基pH下降至4.5以下時,加入甲基紅指示劑呈紅色。如細菌分解葡萄糖產酸量少,或產生的酸進一步轉化為其它物質(如醇、醛、酮、氣體和水),培養基pH在 5.4以上,加入甲基紅指示劑呈桔黃色。
(2)方法:將待試菌接種於葡萄糖磷酸鹽蛋白腖水中,35℃孵育48h~96h後,於5ml培養基中滴加5~6滴甲基紅指示劑,立即觀察結果。
(3)結果判定:呈現紅色者為陽性,桔黃色為陰性,桔紅色為弱陽性。
(4)應用:常用於腸杆菌科內某些種屬的鑒別,如大腸埃希菌和產氣腸杆菌,前者為陽性,後者為陰性。腸杆菌屬和哈夫尼亞菌屬為陰性,而沙門菌屬、誌賀菌屬、枸櫞酸杆菌屬和變形杆菌屬等為陽性。

 

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