顯微鏡油浸係的使用及細菌基本形態觀察

 

1．正確掌握使用及護理顯微鏡的方法，特別是油浸係的使用及護理。

2．認識細菌的基本形態和構造。

普通光學顯微鏡包括機械部分和光學部分兩部分。機械部分包括鏡座、鏡臂、鏡筒、載物台、物鏡轉換器、粗調節螺旋、細調節螺旋、標本夾等。光學部分包括接目鏡、接物鏡、反光鏡、光圈（虹采）、聚光鏡（集光器）等（圖1-1）。

 

浸係是在油浸鏡與標本之間加1滴香柏油，調整光源檢查細菌標本的方法。油浸鏡是一種高倍放大的物鏡，一般都刻有放大倍數，如95x、100x等。其鏡頭標記國產鏡多用“油”字表示，國外產品則用“Oil”（Oil Immersion）或HI（homogeneous Immersion）表示。而且油鏡的鏡身較高倍鏡和低倍鏡為長，鏡片最小，這也是識別的另一種標誌。其使用原理是：由於香柏油與玻璃的折光率相似（香柏油為1.515，玻璃為1.52）。鏡檢時，滴加香柏油的作用是使光源盡可能多的進入物鏡中，避免光線通過折光率低的空氣（折光率為1.0）而散失，因而能提高物鏡的分辨率，使物像明亮清晰（見圖1-2）。

 

 

鏡檢者需姿勢端正，一般用左眼觀察，右眼用於繪圖和記錄，兩眼同時睜開，以減少疲勞。光源用自然光線或人工光源，注意避開直射日光。用人工光源時，為了避免赤黃光線，需在集光鏡下裝入藍色濾光片。

加油  將標本放在載物台上，染色部位正對集光器的中央，用標本夾固定好，滴加香柏油1滴，用油浸鏡檢查，使油鏡頭浸入油滴中，幾乎與標本麵接觸為度，然後由接目鏡注視鏡內，同時慢慢轉動粗調節螺旋提起鏡筒（絕對不能下降鏡筒！）至能模糊看到物像時，再轉動細螺旋（細螺旋轉動一般不超過一周），直至物像清晰為止。

（一）從鏡箱內取顯微鏡時，應以右手持鏡臂以水平方向慢慢抽出，不得碰鏡，再以左手托鏡座，保持鏡體平行，以防反光鏡及接目鏡滑落。

（二）顯微鏡各鏡頭絕對不可用手指拭抹，應用擦鏡紙或用綢布輕拭之。油鏡用過後，立即用擦鏡紙拭之，若油漬已幹，則需用擦鏡紙蘸二甲苯拭之，然後用幹燥鏡紙輕拭之。鏡體可用軟布輕拭，以保持清潔。

（三）用過後應將顯微鏡各部複位，尤其注意不要讓接物鏡對集光器，同時把集光器下降，以免發生碰撞，然後置鏡箱內鎖好。

（四）注意防潮，勿靠近熱源及有腐蝕性的化學藥品。顯微鏡各零件不要任意拆卸，尤其是光學部分，以免損壞。

練習顯微鏡油浸係的使用，觀察已製好的細菌染色標本，如葡萄球菌、鏈球菌、四聯球菌、大腸杆菌、枯草杆菌、螺旋狀菌及細菌的莢膜、芽胞和鞭毛，並進行繪圖。