材料
1、菌種:大腸杆菌、葡萄球菌
2、藥敏紙片、接種環、鑷子、酒精燈、培養箱等
原理
在已接種被測細菌的瓊脂平板上,平貼含有一定量抗菌藥物的藥敏紙片,由於培養基中含大量的水分,所以抗菌藥物很快溶解於培養基內,並向四周擴散,藥物在瓊脂中的濃度隨離開紙片的距離增大而降低,當低於MIC時細菌則生長而形成抑菌環。
在藥物濃度恰高於該藥物對該菌的最低抑菌濃度的瓊脂中,該細菌的生長就受到抑製,在藥物濃度低於該藥物對該菌的最低抑菌濃度的瓊脂中,細菌能夠生長。孵育後,在含藥紙片的周圍形成透明的抑菌環,量取該抑菌環的直徑,可測得該細菌對相應藥物的敏感度。
培養基:水解酪蛋白瓊脂(M-H瓊脂)
抑菌環的直徑與最低抑菌濃度(MIC)呈負相關。
方法:
同連續劃線接種法密集接種細菌(改良的K-B法)。
用無菌鑷子夾取藥敏製片,分別貼於平板上,各藥敏紙片之間的距離應基本相等,一般每個平板貼四個藥敏紙片。
37℃、培養24h後測定抑菌圈,作出結果判定。
敏感程度判斷標準:<10mm---耐藥;10-15mm----中度敏感;>15mm---敏感(非檢驗專業)
接種細菌的量(相當於1/2 0.5麥氏比濁管濃度,即0.75×108)。瓊脂厚度為4mm土lmm (平板直徑9cm)。m、紅黴素15ml,抗生素含量(青黴素10m質量控製:培養基(M-H瓊脂)、紙片性質與直徑(吸水紙、直徑6mm)
定量實驗有:試管稀釋法、E-試驗
定性實驗可指導臨床醫生使用什麽藥物,定量實驗可指導臨床醫生該藥物使用多少量,根據半衰期決定每天給幾次藥。
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