微生物無菌技術之保持無菌狀態

在獲得了無菌環境和無菌材料後，我們還要保持無菌狀態，才能對某種特定的已知微生物進行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相幹的微生物混入的現象，在微生物學中我們叫做汙染雜菌。防止汙染是微生物學工作中十分關鍵的技術。一方麵是徹底滅菌，另一方麵防止汙染，是無菌技術的兩個方麵。另外，我們還要防止所研究的微生物，特別是致病微生物或經過基因工程改造了的本來自然界不存在的微生物從我們的實驗容器中逃逸到外界環境中去。為了這些目的，在微生物學中，有許多措施。

 

　　無菌室一般是在微生物實驗室內專辟一個小房間。可以用板材和玻璃建造。麵積不宜過大，約4—5平方米即可，高2.5米左右。無菌室外要設一個緩衝間，緩衝間的門和無菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進雜菌。門多用推拉式，便於快速啟閉。無菌室和緩衝間都必須密閉。室內裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置。無菌室內的地麵、牆壁必須平整，不易藏汙納垢，便於清洗。工作台的台麵應該處於水平狀態。無菌室和緩衝間都裝有紫外線燈，無菌室的紫外線燈距離工作台麵1米。工作人員進入無菌室應穿滅過菌的服裝，戴帽子。當前無菌室多存在於微生物工廠，一般實驗室則使用超淨台。在條件較困難的地方，也可以用木製無菌箱代替。無菌箱結構簡單，便於移動，箱正麵開有兩個洞，不操作時用推拉式小門擋住，操作時可以將雙臂伸進去。正麵上部裝有玻璃，便於在內部操作，箱內部裝有紫外線燈，從側麵小門可以放進去器具和菌種等。

　　超淨台的應用使微生物學實驗室中的無菌室變得比較不受歡迎了，但是在發酵工廠和其它微生物產業部門大型無菌室仍然非常重要。超淨台是80年代開始問世的一種防止汙染的裝置。其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作台麵上部包括微生物在內的各種微小塵埃。通過電動裝置使空氣通過高效過濾器具後進入工作台麵，使台麵始終保持在流動無菌空氣控製之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動的氣簾防止外部帶菌空氣進入。

　　應該指出的是，無菌操作技術當前不僅在微生物學研究和應用上起著舉足輕重的作用，而且在許多生物技術中也被廣泛應用。例如轉基因技術、單克隆抗體技術等。