三、內容、材料和方法
(一)真菌的營養體
1. 菌絲和菌絲體
除少數原始的類群以外,真菌典型的營養體是極為細小的絲狀體,這種絲狀體稱為菌絲,生長成叢的菌絲稱為菌絲體,低等真菌的菌絲是無隔的,大多數真菌是有隔的。
(1)挑取馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)或瓜果腐黴病菌(Pythium aphanidermatum)製片,鏡檢無隔菌絲。
(2)挑取立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)製片鏡檢有隔菌絲。
(3)觀察各種病原真菌在平麵和斜麵培養基上形成的菌落,注意菌落大小、形狀、厚薄、質地、顏色等形態特點。
2. 菌絲組織體
有些真菌的菌絲體,在一定的條件下或一定的發育階段,可形成特殊的組織體,常見有菌核、子座和根狀菌索。
(1)菌核:菌核是由擬薄壁組織和疏絲組織形成的一種休眠體,既是真菌貯藏養分的器官,又是真菌用以度過不良環境的休眠機構,菌核大小不一,色澤和形狀也各不相同。菌核中的菌絲組織已有分化現象,外皮組織細胞排列緊密,色深壁厚,具有保護作用,為擬薄壁組織;內層細胞壁薄色淡,排列疏鬆,仍可維持營養作用,為疏絲組織。
肉眼觀察麥角病、油菜菌核病、黃瓜菌核病和大蔥菌核病標本,比較菌核形狀、大小、顏色;鏡檢細辛菌核病的菌核製片,注意比較表皮與內部組織細胞的排列特點。
(2)子座:子座是由擬薄壁組織和疏絲組織形成的容納子實體的座墊狀結構,或由菌絲體與部分寄主組織結合而成的稱為假子座。子座是真菌從營養體到繁殖體的過渡機構,除可在其上或其內形成子實體外,也有度過不良環境的作用。
肉眼觀察稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)的分生孢子座;鏡檢蘋果樹腐爛病菌(Valsa mali)和稻香柱菌(Epichloe typhina)所形成的子座製片,注意子座形狀,著生部位及內部繁殖體類別。
(3)根狀菌索:少數高等真菌的菌絲體還可糾結成繩索狀的組織體,形如高等植物的根,故稱根狀菌索,其作用是幫助菌體蔓延和抵抗不良環境,根狀菌縈組織也有表皮和內部組織的分化。
肉眼觀察林木上根狀菌索的外部形狀,注意和菌核比較,找出二者區別。
3. 菌絲體上分化出的吸收養分組織
(1)吸器:是寄生在細胞間的真菌,特別是一些專性寄生菌在菌絲體上形成的吸收養分的器官,形狀有球狀、絲狀、掌狀、裂片狀等。鏡檢小麥白粉病菌(Blumeria graminis)吸器製備片,注意吸器的形狀及其形成的部位。
(2)假根:為伸入基物內的菌絲體,形如高等植物的根係,故稱假根。假根除用其吸收養分外,還有固著菌體的作用。挑取培養基中培養的甘薯軟腐病菌(Rhizopus nigricans)的菌絲(注意針尖要插入培養基內)製片鏡檢或鏡檢根足黴(Rhizopus sp.)製備片,注意假根與普通營養菌絲的區別。
(3)附著胞:從幻燈片或照片觀察病菌侵染寄主植物形成附著胞的形態。
(4)菌環和菌網:捕食性真菌常由菌絲分化成菌環和菌網組織來捕捉線蟲等小動物,然後再由菌絲侵入線蟲體內吸取營養。
(二)真菌的繁殖體——孢子
真菌的繁殖方式分無性和有性兩種,分別產生無性孢子和有性孢子兩大類型。真菌的無性繁殖包括斷裂、出芽和產生孢子等,真菌的有性生殖包括質配、核配和減數分裂三個階段。
1. 無性孢子:不經過性細胞或性器官的結合便能產生孢子,稱為無性孢子。真菌產生的無性孢子類型很多,主要的有遊動孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子。
(1)遊動孢子:遊動孢子為鞭毛菌亞門真菌特有的無性孢子,產生在由菌絲頂端細胞或由菌絲分化成的孢子囊梗的頂端細胞膨大形成的孢子囊內、具鞭毛,能遊動。
製片鏡檢用線麻粒誘發的綿黴和水黴的遊動孢子囊和遊動孢子,鏡檢番茄晚疫病菌(Phytophthora infestans)的遊動孢囊梗、遊動孢子囊和遊動孢子。
(2)孢囊孢子:孢囊孢子為接合菌亞門真菌特有的無性孢子,生成方式和遊動孢子相似,也是內生的,但無鞭毛,不能遊動。
挑取黑根黴(Rhizopus sp.)製片(或取製備片)鏡檢孢子囊梗,孢子囊和孢囊孢子,注意觀察孢子囊的形態及其著生位置及孢囊孢子的形態,顏色和產生的數目。
(3)分生孢子:子囊菌亞門真菌和大部分半知菌亞門真菌都產生分生孢子,分生孢子外生在分生孢子梗上,形狀、大小、顏色不一,單生,鏈生或集生,分生孢子梗有的散生,有的束生,有的產生在分生孢子盤上或分生孢子器內,產生在分生孢子器內的分生孢子也叫器孢子。
取玉米大斑病(Exserohilum turcicum)的病葉,用刀片輕輕刮取病斑上的黴狀物製片鏡檢分生孢子梗和分生孢子或挑取斜麵培養基上培養的小麥根腐病菌(Bipolaris sativum)製片鏡檢分生孢子梗和分生孢子,另取蘋果灰斑病(Phyllosticta pirina)製片鏡檢分生孢子器和器孢子,注意分生孢子的形狀,色澤,細胞數目及著生情況。
(4)厚垣孢子:鏡檢厚垣孢子製備片,菌絲中或孢子中個別細胞膨大、細胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。
2. 有性孢子:由兩個不同的性細胞或性器官相結合而產生的孢子叫有性孢子,有性孢子主要有以下4種。
(1)卵孢子:部分鞭毛菌亞門真菌的有性孢子,由菌絲上產生的兩種異形配子囊交配產生。
製片鏡檢穀子白發病菌(Sclerospora graminicola)的卵孢子或鏡檢大豆霜黴病菌(Peronospora manshurica)卵孢子製備片,注意卵孢子形狀、大小、顏色,孢壁形態。
(2)接合孢子:為接合菌亞門真菌的有性孢子,由兩個同形配子囊交配而成。鏡檢毛黴(Mucor)接合孢子製片,注意接合孢子的大小,形狀,顏色及表現特點。
(3)子囊孢子:為子囊菌亞門真菌產生的有性孢子,由兩個異形配子囊交配生成,子囊孢子產生在子囊內,多為8個,子囊除極少數子囊菌裸生外,多數子囊菌生於子囊果中。
取山楂白粉病(Podosphaera oxyacanthae)病葉,用解剖針將白粉上的小黑點(閉囊殼)仔細撥至載玻片上的水滴中,加蓋片並輕輕壓破閉囊殼,鏡檢閉囊殼,子囊、子囊孢子和附屬絲的形態,特別注意子囊的數目和附屬絲的特點,另取油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotium 132)製備片,鏡檢子囊盤、子囊和子囊孢子。
(4)擔孢子:為擔子菌亞門真菌的有性孢子,由菌絲結合後減數分裂而成,外生於擔子或先菌絲上。
備片,鏡檢冬孢子、先菌絲及擔孢子的形態,比較兩種黑粉病菌的區別。
另外還有一種有性孢子為休眠孢子囊,由兩個遊動配子結合而成,為二倍體,萌發時減數分裂釋放出單倍體的遊動孢子。如壺菌、根腫菌可產生休眠孢子囊,根腫菌產生的休眠孢子囊萌發時通常隻釋放出一個遊動孢子,有時也稱為休眠孢子。
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