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關於甘油菌種保藏



錄入時間:2011-6-24 9:31:46 來源:互聯網

 
用甘油+LB保存,離心培養的菌液,加入適量的滅菌甘油+LB。
 
搖瓶培養到對數生長期的菌液倒到滅過菌的50ml的離心管中,8000rpm離心10min,去掉上清液,在超淨台上加滅過菌的15%甘油+LB 10-15ml,分裝入凍存管中。
 
挑取細菌到LB培養基中過夜培養,取500ul的甘油和500ul的菌液在EP管中混合均勻,保藏即可,甘油的濃度是40%,
 
可以直接取1.5ml菌液,離心,加入1ml40%甘油即可。若菌量太少,可以在離心後倒掉上清液,再取一次菌液,離心。 
 
先配40%的甘油管,一定滅菌,然後把你的菌液加入等體積的就可以了,短時間的保存是沒問題的。 
 
400ul 菌液 + 400ul 40%甘油-水(滅菌),混勻,-80°保存 
 
菌液和甘油混合後,最好速凍一下,然後直接-80度保存起來 

 

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