菌種保存及培養

 

一般用到大腸杆菌，金葡菌，黑曲黴，白色念珠球菌，生孢梭菌，枯草芽孢等，我們的目的是保藏一年，標準是買進時是第二、三代，使用時不超過第五代。

 

方法：普通冰箱0度一下冷藏。先把買回來的二代菌在相應的培養基中培養分離，觀察菌落形態和做革蘭氏染色，確定是我們所需要的菌後，再事先準備好半固體瓊脂小管，接著用接種環挑取菌落穿刺接種於瓊脂的斜麵及高層，然後在覆蓋上事先準備好的滅過菌並幹燥過的液體石蠟，約1CM。就可以冷藏了，有效期一年。

 

一般是製備12支，然後要用時在取出一支活化後劃線接種於瓊脂斜麵，培養24小時候，冷藏在冰箱裏，有效期一月，這個製備4支。這樣就能保證每周都有菌用了，使用時是第四代或第五代。

 

如果是第三代想用第四代的話，就可以把買回來的菌斜麵跳過平板劃線形態及革蘭氏檢查（正規渠道買的菌一般還是可靠的），直接做半固體穿刺接種以後用液體石蠟封起來後冷藏（多做幾支）。使用時再活化後劃線於營養瓊脂斜麵，培養24小時，這時就可以挑取菌落使用了（第四代），有效期一個月(這個斜麵製備4支冷藏，那麽就可以每周使用一支了)。也就是說石蠟管做了幾支就可以用幾個月，但最多是一年。