當環境溫度不適應果蠅生長時(溫度低於18℃) ,培養基接種後的7d內,特別容易長黴。
要避免長黴,應注意:
①培養果蠅的器皿要嚴格消毒。培養瓶洗幹淨後,自然涼幹, 再與棉塞一道進行高溫幹燥滅菌(120℃, 30min) 。
②培養基營養要全麵。果蠅培養基的種類很多,本實驗室用的是玉米培養基,配方如下:水750mL煮開,加瓊脂6. 2g,待瓊脂溶解後加白糖62.5g,攪拌溶解後加調成糊狀的玉米糊(玉米粉82. 5g,用冷水調成糊狀) ,煮開2~3min,加酵母粉7g,加熱1~2min,攪拌均勻後,移去火源,加丙酸2mL (起殺菌防黴的作用) 。培養基稍稍冷卻後,倒入已滅菌的培養基瓶中,盡量不要讓培養基粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有餘熱的幹燥箱中將瓶壁上的水蒸幹。
③接種時消好毒。在無菌室內接種, 如沒有無菌室, 在接種前用75%酒精棉球擦雙手一遍。接種後,放入適宜果蠅生長溫度的培養箱中培養果蠅(溫度20~25℃) ,一旦下一代成蠅孵出來後,培養基就不易長黴。
長黴後的處理方法
若培養基長黴後,由於黴菌孢子漂浮於培養瓶的整個空間,包括果蠅身上,如將此果蠅接種到新的培養基中,大約經過4 ~5d,培養基將會重新長出黴菌來,遇到該問題,解決的方法隻有兩種:一是不再接種這種長黴菌果蠅,重新接種未長黴的果蠅;二是采取措施殺死果蠅身上的黴菌孢子。
殺黴菌方法為:將帶有黴菌孢子的成蠅倒入空培養瓶中,棉塞上倒適量的75%酒精,再將瓶口塞緊,利用酒精具有揮發性,揮發後的酒精充滿整個瓶內,從而將果蠅身上的黴孢子殺死。
在操作上應注意兩點:一是倒在棉塞上的酒精量要合適,過多果蠅易醉昏,過少殺死不了黴菌孢子;二是果蠅呆在空瓶內的時間要恰當,以2d為好。
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