酵母遺傳學方法
1）總酵母RNA的分離
1．在每毫升培養物中加入50μg環乙酰亞胺，在30℃下振蕩15分鍾。此步亦可省略，但是有人認為環乙酰亞胺可防止mRNA凝集在多核糖體上。
2．迅速冷凍收集細胞，在大離心管中加入約一半體積的碎冰，將培養物倒入，振蕩，在4℃下以5000r/min離心5分鍾。
3．加入11g玻珠於30ml離心管中，以Corex玻璃離心管為最佳，不過塑料離心管也能使用。
4．加入3ml已用LETS緩衝液平衡的苯酚到玻珠中。
LETS緩衝液：
0.1 mol/L 氯化鋰
0.01 mol/L Na2EDTA
0.01 mol/L Tris-HCl (pH7.4)
0.2% SDS
0.1% 二乙基焦碳酸（可任選）
5．用2.5ml冰預冷的LETS緩衝液懸浮細胞，並將其加入到上述玻珠苯酚管中。為了使細胞破碎的最好，液麵應剛好高於玻珠表麵。
6．高速振蕩30秒後，在冰上置30秒，交替進行3分鍾，用相差顯微鏡檢測細胞破碎情況，破碎的細胞呈現無折射的空細胞。
7．當至少90%細胞破碎後，用5ml冰預冷的LETS緩衝液，輕微振蕩，用Sorvall SS－34轉頭以8000r/min離心5分鍾，使溶液分相。離心後，酚層和蛋白質界麵應剛好低於玻珠表麵，移出水相而不會觸動界麵。
8．將水相轉到一個幹淨離心管，用5ml苯酚：氯仿：已戊醇（25：24：1）抽提2次，避免觸動界麵。用氯仿抽提一次。
9．加入1/10
體積的5mol/L氯化鋰，在－20℃下沉澱3小時。此時，RNA沉澱可在－20℃下存放。
2）Poly(A)+RNA的分離
1．將保存的RNA用Sorvall SS-34轉頭以10 000r/min離心10分鍾，收集RNA沉澱，用80％乙醇洗滌。真空幹燥後，溶於2.5ml蒸餾水中，溶解後加入2.5ml 2×上樣緩衝液，同時加SDS至終濃度為0.3％。
2．置65℃保溫5分鍾。
3．裝一個oligo（dT）柱，用1×上樣緩衝液洗3次。
4．用10mmol/L HEPES（pH7）洗脫Poly（A）＋RNA。如果希望得到更滿意的結果，可用加入RNase抑製劑。
5．用蒸餾水對Poly（A）＋RNA進行10倍稀釋，通過OD260的光吸收測定RNA濃度。用水將10mmol/L HEPES(pH7)稀釋10倍作為對照。
6．加1/10體積3mol/L醋酸鈉和2.5倍體積的無水乙醇沉澱RNA，上下倒置混勻，在－70℃下放置30分鍾。離心10分鍾，棄上清液，用水溶解RNA沉澱使終濃度為1mg/ml。不管是溶解的RNA或是乙醇沉澱的RNA都能在－70℃下長期保存。
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