呼吸係統感染的微生物檢查(2)

 

 

⑵分離培養與鑒定

 

①定量細菌培養：對痰標本或肺泡灌洗液進行定量細菌培養，計算每毫升中不同種類的細菌數（CFU/ml），並鑒定細菌。

 

 

②肺炎鏈球菌：肺炎鏈球菌在血平板上菌落為扁平、表麵光滑、周圍有草綠色溶血環，有的菌落中央塌陷，呈臍窩狀。該菌膽汁溶菌試驗陽性、發酵菊糖、Optochin敏感試驗陽性，小白鼠毒力試驗陽性等。

 

③流感嗜血杆菌（Heamophilus influenzae）：將標本接種在巧克力選擇瓊脂平板上，放置含5%~10%CO２環境培養。細菌與金黃色葡萄球菌一起培養時有“衛星現象”（satellite phenomenon）。菌體為多形性革蘭陰性小杆菌。根據生長需要Ｘ、Ｖ因子、生化反應鑒定細菌。

 

④軍團菌（Legionella）：標本接種在活性炭酵母浸膏培養基上（BCYE）培養，隻能在BCYE培養基上生長的革蘭陰性杆菌（不易著色），結合生化反應和血清學分型鑒定細菌。

 

⑤結核分枝杆菌：痰液或支氣管肺泡灌洗液經處理雜菌後接種培養。（與尿結核菌培養方法相同）。

 

⑥肺炎支原體（Mycoplasma pneumonia）：肺炎支原體對營養要求比較高，培養基中需加入小牛血清和新鮮酵母液等。將采集的咽拭子標本、支氣管分泌物、鼻咽洗液、痰等標本接種於液體和固體選擇培養基中培養１～２周，結合菌落生長特性和生化反應鑒定。因肺炎支原體培養時間長而且陽性率很低，臨床常采用血清學或分子生物學方法檢測。

 

⑦肺炎衣原體和呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒等不同病毒需選擇不同的敏感細胞株進行培養。

 

4、臨床意義

 

⑴病毒感染：流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒和冠狀病毒等為呼吸道感染的常見病毒，免疫功能低下者如嬰幼兒、老年人、癌症患者、器官移植病人等易發生感染。引起嚴重急性呼吸綜合征（SARS）的新型冠狀病毒在2003年的流行中，中青年感染者居多。不同種類病毒引起的臨床表現和造成的嚴重程度不同，如較重者患有急性和慢性支氣管炎、毛細支氣管炎和急性肺炎。甲型流感病毒易發生變異，新變異株除散發流感外，還引起爆發流行。近年，巨細胞病毒（CMV）引起的肺炎有增加趨勢。病毒性肺炎嚴重者發生死亡。

 

⑵細菌感染：下呼吸道細菌感染是導致病人死亡的一個主要原因。臨床常見感染有急性和慢性氣管炎、支氣管炎、肺炎、肺膿腫、胸腔膿腫、肺結核病等。常見感染細菌有肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、卡他布蘭漢菌、銅綠假單胞菌、產ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌、沙雷菌、不動杆菌、流感嗜血杆菌等。肺膿腫常常伴有厭氧菌感染，偶見奴卡菌或放線菌感染。嗜肺軍團菌肺炎及其小型爆發，國內有不少報道。近年，結核病有回升趨勢，而且結核分枝杆菌多重耐藥菌株也不斷增加，全球每天約有8000人死於結核病，世界衛生組織已將結核病作為重點控製的傳染病之一。此外，非結核分枝杆菌感染有增多趨勢。白喉棒狀杆菌引起傳染病白喉（diphtheria），細菌在咽部粘膜上繁殖，形成白色偽膜，繼而發生在喉部或氣管內，容易造成窒息死亡。目前，該病幾乎絕跡。

 

由於病人自然咳出的痰容易被口腔正常菌群汙染，痰培養生長的細菌，有時難以評價是否有臨床意義，通過對痰質量的評定和定量細菌培養，尚有一定的參考價值。當痰細菌計數≥106CFU/ml或經纖維支氣管鏡、人工氣道吸引采集的下呼吸道分泌物細菌計數≥105CFU/ml、支氣管肺泡灌洗液細菌計數≥104CFU/ml和防汙染支氣管肺泡灌洗液（PBAL）細菌計數≥103CFU/ml時，具有臨床診斷意義。

 

⑶真菌感染：免疫功能低下者如白血病病人和其他長期應用抗菌素治療的重症病人，容易引起真菌性肺炎。病原真菌常以白念珠菌為主，其他可見曲黴菌、毛黴菌、組織胞漿菌等。AIDS患者易發生卡氏肺孢子菌（pneumocystis carinii）感染。

 

⑷支原體感染：肺炎支原體是人類原發性非典型肺炎（primary atypical pneumoniae, PAP）的主要病原體之一，肺炎支原體主要經飛沫傳播，可導致疾病的流行，兒童及青少年多見發病。

 

⑸衣原體感染：肺炎衣原體(Chlamydia pneumonia)在人之間通過飛沫傳播，引起支氣管炎、肺炎等，兒童和青少年容易感染，感染率為10%左右。我國成人肺炎衣原體抗體陽性率高達50%左右。鸚鵡熱衣原體肺炎是由於人接觸鳥類而感染。新生兒沙眼衣原體肺炎多因其在分娩過程中感染所致。