為進一步弄清玻片法對葡萄球菌血漿凝固酶試驗鑒定的準確性,我們收集了玻片法結果陽性的葡萄球菌118株,按Kloos等[1]分類方法進行詳細鑒定與分類,結果報告如下。
1 材料與方法
1.1 菌株來源 菌株分離於1996年8月~1997年12月我院住院及門診患者各類標本中,計118株。標準菌株ATCC 25923由天壇生物製品檢定所提供。
1.2 菌種鑒定方法 將經玻片法凝固酶試驗鑒定的、經純化培養後保存於瓊脂斜麵的“金葡菌”118株,傳代培養,按照Kloos等[1]方法再鑒定。
2 結果
2.1 菌種鑒定結果 金黃色葡萄球菌23株,中間型葡萄球菌28株,表皮葡萄球菌19株,溶血葡萄球菌15株,裏昂葡萄球菌9株,人葡萄球菌7株,耳葡萄球菌7株,華納葡萄球菌3株,其餘是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株,共10種。
2.2 玻片法凝固酶重複試驗結果 在限時操作的10秒種內,呈陽性反應者,23株金黃色葡萄球菌中有22株,28株中間型葡萄球菌中有25株,陽性反應準確率為92.16%(47/51)。 2.3 菌種與樣品來源關係的觀察,見表1。
表1 不同臨床標本葡萄球菌的分離情況
|
株數 |
標本來源 |
|
|
痰 |
傷口分泌物 |
耳分泌物 |
尿道分泌物 |
血液 |
尿液 |
其它 |
金黃色葡萄球菌 |
23 |
0 |
17 |
2 |
1 |
0 |
1 |
2 |
中間型葡萄球菌 |
28 |
2 |
10 |
7 |
1 |
1 |
7 |
0 |
表皮葡萄球菌 |
19 |
1 |
0 |
0 |
2 |
1 |
14 |
1 |
溶血葡萄球菌 |
15 |
8 |
1 |
0 |
1 |
1 |
2 |
2 |
裏昂葡萄球菌 |
9 |
0 |
0 |
0 |
5 |
0 |
4 |
0 |
其它型葡萄球菌 |
24 |
0 |
0 |
0 |
8 |
1 |
15 |
0 |
合計 |
118 |
11 |
28 |
9 |
18 |
4 |
43 |
5 |
2.4 β-內酰胺酶測試結果 采用酸測定法。同時用大腸埃希菌ATCC 35218及金黃色葡萄球菌ATCC 25923為質控菌株。118株葡萄球菌中,產酶株有61株,占51.69%。在產酶株中,以中間型葡萄球菌產酶率最高,占85.71%(24/28)。
2.5 抗生素敏感試驗結果 10種葡萄球菌對12種抗生素耐藥性相差不大,除對萬古黴素、丁胺卡那黴素以及加酶抑製劑的抗生素敏感外,對其餘抗生素敏感性均較低。
3 討論
為防止玻片法檢測血漿凝固酶試驗假陽性反應,必須嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》[2]進行操作,即在10秒內|檢驗地帶網|完成此試驗。本室以前將此實驗延時1~2分鍾觀察,致使假陽性率高達56.78%(67/118)。同時,為防止假陽性反應,還必須做試管法血漿凝固酶試驗,以免“遊離”的凝固酶漏檢。
凝固酶陽性的葡萄球菌可分為金黃色葡萄球菌、中間型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。因此凝固酶試驗陽性者不能定為金黃色葡萄球菌,必須再進行有關生化試驗如耐熱DNA酶、β-半乳糖苷酶,方可正確鑒定。
參考文獻
1 Kloos W E,Lambe D W.Staphylococcus.In:Albert B.ed,Manual of Clinical microbiol.5 th ed.Washington:American society for microbol,1991.222
2 葉應嫵,王毓三主編.全國臨床檢驗操作規程.第二版.南京:東南大學出版社,1997.553~569
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