1.革蘭氏染色法
是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克裏斯蒂安·革蘭（Hans Christian Gram，1853年－1938年）於1884年所發明，最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係。
未經染色之細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察陽性紫色陰性紅色。染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征，而用以分類鑒定。
2.實驗原理
通過結晶紫初染和碘液媒染後，在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物，革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，，因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑後，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出，因此通過乙醇脫色後仍呈無色，再經沙黃等紅色染料複染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
3.致病菌
如：金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等屬革蘭氏染色陽性菌。
百日咳杆菌、大腸杆菌、傷寒杆菌、痢疾杆菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等屬革蘭氏陰性。
所以根據細菌的革蘭氏染色性質，可以縮小鑒定範圍，有利於進一步分離鑒定，以對疾病做出診斷。又由於各種抗生素的抗菌譜不同，革蘭氏染色尚可做為選用抗生素的參考。
4.實驗方法
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、複染等四個步驟，具體操作方法是：
1）塗片固定。
2）草酸銨結晶紫染1分鍾。
3）自來水衝洗。
4）加碘液覆蓋塗麵染約1分鍾。
5）水洗，用吸水紙吸去水分。
6）加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。
7）蕃紅梁色液（稀）染2分鍾後，自來水衝洗。幹燥，鏡檢。
5.染色結果
革蘭氏正反應菌體都呈紫色，負反應菌體都呈紅色。
6.臨床意義
其重要的臨床意義在於：
1）鑒別細菌；
2）選擇藥物；
3）與致病性有關：革蘭氏陽性菌能產生外毒素，革蘭氏陰性菌能產生內毒素，兩者的致病作用不同。
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