中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索

布氏杆菌實驗診斷技術



錄入時間:2011-6-3 14:55:05 來源:檢驗地帶網

 
《WHO實驗室生物安全手冊》將布氏杆菌列為Ⅲ類危險級。布氏杆菌病是最容易實驗室感染的疾病之一,當處理培養物和嚴重感染樣品(如流產的材料)時要采取嚴格的安全預防措施。羊種布氏杆菌對人有高度致病性,是世界上最嚴重的人畜共患病之一。牛種布氏杆菌對人也具有高度致病性,實驗室操作活的培養物或動物的汙染材料是很危險的,必須在嚴格的生物安全三級或更高控製條件下進行,盡量減少職業暴露。處理大量布氏杆菌建議使用不低於生物安全三級的控製條件。職業性接觸常致病,通常口、呼吸係統、結膜是主要感染途徑,食人感染的奶製品構成主要的公共衛生危害。獸醫和農民經常接觸感染動物和流產胎兒或胎盤,存在很大的職業危險。
 
 
    1.樣品收集與培養
    以細菌培養診斷動物布氏杆菌病時,樣品的選擇應以觀察到的臨床症狀為依據。最有用的樣品包括流產的胎兒(胃內容物、脾、肺)、胎膜、陰道分泌物(陰道衝洗物)、奶、精液、關節炎和水囊瘤液。死後采集樣品的首選組織為網狀內皮組織(如頭、乳腺和生殖器淋巴結及脾)、懷孕後期或生產後早期的子宮、乳房。通常2-3天即可見有菌落生長,如無細菌生長也要培養8-10天才能認為是陰性而棄去。所有樣品采集後應冷藏並立即用最快的方式運送到實驗室。送到實驗室時,奶和組織樣品如不馬上分離應冷凍保存。
 
    2.培養特性
    布氏杆菌為需氧菌,對營養要求嚴格,初代分離培養時,須在含肝湯、血清等營養豐富的培養基上才能生長。許多實驗室在基礎培養基(如血瓊脂基礎、哥倫比亞瓊脂)中加入血清以促進某些布氏杆菌菌株的生長,如加入2%~5%的牛血清或馬血清,則是牛種布氏杆菌2型生長所必需的。其他合適的培養基還有血清葡萄糖瓊脂(SDA)、甘油葡萄糖瓊脂。該菌生長緩慢,一般需要7一“天或更長時間才能長出肉眼可見的菌落。比較起來,羊種布氏杆菌生長最慢,豬種布氏杆菌最快,牛種布氏杆菌介於兩者之間。多次傳代後,不但生長變快(2-3天即可長出菌落),而且對營養要求低,在普通培養基上也能生長。在血清肝湯瓊脂上,形成濕潤、閃光、表麵隆起、邊緣整齊的菌落。直徑1~2mm。透射光下,菌落呈淺黃色有光澤,半透明。從上麵看,菌落微隆起,灰白色。隨時間推移,菌落變大,顏色變暗。光滑型(S)布氏杆菌在培養特別是繼代培樣時易發生變異而形成粗糙型(R),菌落透明度降低、邊緣粗糙、表麵幹燥、在折射光下呈暗白或黃色。變異檢查操作簡單,如用結晶紫染色,粗糙型菌落染成紅色;而光滑型菌落染成淺黃色。如果菌落是光滑型的,則應用光滑型牛種布氏杆菌抗血清或最好用A和M表麵抗原特異單價抗血清進行試驗。若為非光滑型菌落,分離物應用布氏杆菌R抗原的抗血清進行測試。
 
    3.形態與染色
    該菌初次分離培養時多呈球杆狀,牛布氏杆菌、豬布氏杆菌經傳代培養漸呈杆狀,羊布氏杆菌則不變。布氏杆菌多為長0.6-1.5gm,寬0.5-0.7/zm的球杆菌或短杆菌。它們多單獨存在,很少成對或成團。布氏杆菌無鞭毛不運動、無菌毛、無芽孢、不形成真正的莢膜。布氏杆菌革蘭染色陰性,一般不發生兩極著染。用改良Ziehl-Neelsen方法染色,布氏杆菌菌體染成紅色,背景為藍色。
 
    4.生化特性
    該菌分解糖類的能力因種類而不同。一般能分解葡萄糖產生少量酸,不能分解甘露糖,不能產生靛基質,不液化明膠,不凝固紫乳。VP試驗及MR試驗均陰性。有些菌型能分解尿素和產生H2S。

 

上一篇:影響尿培養結果的因素

下一篇:細菌培養及藥敏分析

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294