細菌培養檢測技術（1）

　細菌的培養技術是微生物實驗中基本技術之一。大多數細菌均可用人工方法培養，隻有將細菌培養出來才能對它進行研究和鑒定
　　一.培養基的種類
　　培養基（culture medium）是細菌生長繁殖所需要的各種營養物質的人工製品。適宜的培養基能使細菌在體外迅速生長繁殖，便於對細菌進行分離和鑒別。可分為基礎培養基、營養培養基、選擇培養基、鑒別培養基、厭氧菌用培養基和特殊培養基。
　　（一）基礎培養基
　　隻含有細菌生長所需的最基本營養成分，應用最廣泛，為製備多種培養基的基礎，常見的有肉湯培養基、瓊脂培養基。
　　（二）營養培養基
　　在基礎培養基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有機物，可供營養要求較高的細菌生長需要或增菌用。如結核分枝杆菌培養基中添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。
　　（三）選擇培養基
　　利用不同種類細菌對化學物質的敏感性不同而製成，使分離菌大量繁殖而抑製其它細菌生長的培養基。培養基中含有的抑製劑能抑製非目的菌生長或使其生長不佳，有利於目的菌的檢出和識別。選擇培養基多為固體平板，用於從標本中分離某些特定的細菌。
　　（四）鑒別培養基
　　培養基中加有某些特定成分，如糖、醇類和指示劑等，用於檢查細菌的各種生化反應，以資鑒別和鑒定細菌。
　　（五）厭氧菌用培養基
　　專性厭氧菌須在無氧條件下才能生長，故需在培養基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸鈉等還原劑，降低培養基中氧化還原電勢，並應與外界空氣隔絕，使培養基本身為無氧的環境。
　　（六）特殊培養基
　　為某些需要在特殊條件下才能生長的細菌培養之用。如高滲鹽增菌培養基、高滲糖增菌培養基、改良 Kagan氏培養基等。
　　二.培養基的製備
　　製備一般培養基的主要過程基本相似，包括調配、溶化、調整 pH、過濾、分裝、滅菌及檢定和保存。
　　三.細菌檢驗室的注意事項及無菌技術
　　細菌培養必須隨時為防止汙染和病原菌的擴散而進行操作，即無菌操作。細菌檢驗室的注意事項如下：
　　1．細菌的培養應在接種罩或無菌室內進行。有條件的實驗室可在超淨工作台內進行。
　　2．用接種環分離和移種細菌時，用前用後均需滅菌處理。一般采用火焰滅菌法。
　　3．從培養瓶或試管培養物中取標本或移種時，在打開瓶口、管口或關閉前，均要在火焰上通過2～3次。切不可將含菌材料汙染台麵和其他物體。
　　4．如不慎將試管等打破造成菌液汙染時，不要驚慌，應立即報告負責人，然後用3％來蘇或5％石炭酸處理汙染台麵或地麵，至少浸泡30分種。
　　5．工作完畢後，用紫外光燈照射30分鍾，或用3％來蘇擦拭台麵，並清洗雙手。
　　 四、接種環和接種針使用
　　接種環和接種針由三部分組成，即環（針）部分、金屬柄部分和絕熱柄部分。接種環和接種針通常選用電熱（鎳）絲，環的直徑隨使用目的而不同，一般多為2～4mm，環和針的長度為40～50mm。
　　接種環（針）使用前後均應進行滅菌處理，將接種環（針）末端直立火焰中，燒紅鎳絲部分，再使接種環（針）金屬柄旋轉通過火焰3次滅菌，冷卻後用以取菌或待試標本。使用接種環（針）完畢後立即將染菌的鎳絲部分於還原焰（內焰）中加熱，烤幹環（針）端附著的細菌或標本，以免環（針）上殘餘的細菌或標本因突受高熱，爆烈四濺，而汙染環境和導致傳染危險。然後再移於氧化焰（外焰）中燒紅滅菌，最後將金屬柄部分往複在火焰中通過3次。用完後的接種環（針），應立即擱置於架上，切勿隨手棄置，以免灼焦台麵或其他物件。