蠟樣芽胞杆菌及其檢驗

蠟樣芽胞杆菌及其檢驗
Examination of Bacillus cereus

 

一、蠟樣芽孢杆菌

蠟樣芽孢杆菌(Bacillus cereus)食物中毒於1950年由Hauge首次報道於挪威，此後歐美許多國家都有陸續報道。本菌引起的食物中毒在我國亦屢有發生。蠟樣芽孢杆菌食物中毒的機製比較複雜，一般認為是由活菌及其產生的腸毒素共同作用所致。該細菌為條件致病菌，當食品中細菌含量達到10⁶個/g時，人食入後可導致食物中毒發生。

nBacillus cereus is an endemic, soil-dwelling, Gram-positive, beta hemolytic bacteria that causes foodborne illness.

n"endemic" means exclusively native to a place or biota

nB. cereus bacteria are facultative aerobes, and like other members of the genus Bacillus can produce protective endospores.

nAn endospore is a dormant, tough, non-reproductive structure produced by a small number of bacteria. The primary function of most endospores is to ensure the survival of a bacterium through periods of environmental stress. They are therefore resistant to ultraviolet and gamma radiation, desiccation, lysozyme, temperature, starvation, and chemical disinfectants.

Variations in endospore morphology.

(1, 4) Central endospore     (2, 3, 5) terminal endospore      (6) lateral endospore

蠟樣芽孢杆菌的形態、染色、生化及培養特性與普通培養下的炭疽杆菌極為相似，故又稱之為“類炭疽”。

1.形態染色特性

本菌為革蘭氏陽性大杆菌，大小為1～1.2 ×3～5µm，菌體兩端較平整，短鏈或長鏈狀排列。無莢膜，芽孢呈橢圓形，位於菌體中央或稍偏於一端。有鞭毛，可運動。

2. 培養特性

需氧菌，生長溫度10～45℃，最適溫度為28～37℃。適宜pH範圍為4.9～9.3。對營養要求不高，在普通瓊脂培養基上菌落為灰白色、不透明、邊緣不整齊、表麵粗糙，類似蠟滴狀。在血液瓊脂上，可形成淺灰色、不透明、扁平、邊緣不整齊的毛玻璃樣菌落，有β-溶血。在甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)瓊脂上，本菌菌落為乳白色或淡粉色，扁平，表麵粗糙，菌落背景呈紫紅色，菌落周圍環繞白色輪暈。在普通肉湯中生長迅速，可形成菌膜或菌環，振搖易乳化。

3. 生化特性

分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊苷和覃糖，不分解乳糖、甘露醇、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、肌醇、山梨醇和側金盞花醇；靛基質陽性；MR試驗陰性，V-P試驗陽性；不分解尿素；KCN試驗陽性；卵磷脂酶陽性；能利用枸櫞酸鹽；能還原硝酸鹽；過氧化氫酶陽性；可液化明膠。

 

二、檢驗

常規檢驗法： GB/T 4789.14-2003    1、菌數測定 2、證實試驗3、動物試驗 4、血清學試驗

1．菌數測定

無菌采取檢樣25g(mL)，用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩衝液作10^–1～10^–5的稀釋液，每稀釋度各取0.1mL均勻塗布於選擇培養基(MYP瓊脂)，37℃培養12～20h，選擇典型菌落數在30個左右者進行計數，蠟樣芽孢杆菌在此培養基上菌落為粉紅色，周圍有粉紅色的輪暈。計數後，從中挑出5個典型菌落作證實試驗。根據證實為蠟樣芽孢杆菌的菌落數計算出該平皿內的本菌數，然後乘以其稀釋倍數，即得到每1g(mL)檢樣中所含蠟樣芽孢杆菌的數量。例如，MYP平板上可疑菌落為25個，取5個鑒定，證實為4個，該平板樣品稀釋倍數為10⁴，則1g(mL)檢樣中蠟樣芽孢杆菌數為：25×4/5×10⁴×10=2×10⁶