空腸彎曲菌及其檢驗

空腸彎曲菌及其檢驗
Examination of Campylobacter jejuni

空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni)是彎曲菌屬( Campylobacter )的一個種。首次分離：1972年，比利時Butzler等，腹瀉病人糞便。主要引起：人及動物急性腹瀉；集體食物中毒。與人類有關的：空腸彎曲菌、胎兒彎曲菌及小腸彎曲菌，其中以空腸彎曲菌致病最多。

流行病學特征

家畜、家禽腸道正常菌群

傳染源：病人，帶菌者 ，帶菌動物

傳播途徑：動物→人: 密切接觸、糞口傳播； 人 → 人 : 糞口傳播

人群易感性：人群普遍易感；1～5歲兒童發病率最高

一、生物學特性

1. 形態染色特性

革蘭氏陰性無芽孢杆菌，呈弧形、螺旋形或S形，大小約為1.5～5×0.2～0.5μm。有一根端鞭毛，長度約為菌體的2～3倍。有莢膜。有動力，新鮮培養物在相差或暗視野顯微鏡下可看到細菌呈跳躍或射標樣運動。在陳舊培養物中或培養環境變堿時形態易變為球形並喪失動力。

2. 培養特性

需微需氧環境才能生長，最適氣體條件是N₂、CO₂、O₂含量比為85: 10:5。最適溫度42℃，最適pH為7.2。本菌對營養要求較高，在一般的腸道菌分離培養基中不能生長，隻有在含有血液、血清、營養豐富的培養基上才能生長良好，可見無色半透明毛玻璃樣小菌落，單個菌落呈中心凸起，周邊不規則，無溶血現象。在TTC培養基上菌苔呈紫色光澤。

3. 生化特性

生化反應不活潑。不發酵糖類；不液化明膠；MR和V-P試驗均為陰性；氧化酶陽性；觸酶陽性；不產生硫化氫；尿素酶陰性；在3.5%NaCl環境中不生長，1%甘氨酸中和馬尿酸鈉培養基中生長，煌綠(1: 10^-5)中不生長；除個別菌株外，均無色素產生。

4. 血清學特性

本菌抗原構造與腸道杆菌一樣具有O、H和K抗原。根據O抗原，可把空腸彎曲菌分成45個以上血清型，第11、12和18血清型最為常見。

二、檢驗

一)樣品的的收集與處理

二)常規檢驗方法(GB/T 4789.9-2003)

1、微需氧條件的準備       2、分離與初步鑒定      3、確定鑒定

4、生物分型 ：1)快速馬尿酸鈉水解試驗；2)快速硫化氫試驗；3)DNA酶水解試驗。

5、血清學鑒定：1)間接血凝分型法；2)Lior玻片凝集法。

三)其它檢驗方法

1、微需氧條件的準備       換氣法    氣袋法    燭缸法   雙平板法

2、分離與初步鑒定     分離：改良Camp-BAP，Skirrow氏培養基。

第一型菌落：不溶血，灰色、扁平、濕潤、有光澤，露滴狀，有沿接種線擴散的傾向。

第二型菌落：不溶血，常呈分散凸起的單個菌落(1mm～2mm)，邊緣完整、發亮。

初步鑒定：  氧化酶陽性，觸酶陽性         Gram’s染色         暗視野或相差顯微鏡觀察動力

3、確定鑒定

甘氨酸耐受性試驗:生長，＋ ;  硫化氫試驗:－ ;  3.5%NaCl耐受性 :－;  42℃和25 ℃生長試驗:42℃＋，25 ℃－;

馬尿酸鈉水解試驗 :＋;  萘啶酸試驗 :敏感;   TTC試驗 :紫色菌苔;     硝酸鹽還原試驗 :＋

4、生物分型

空腸彎曲菌生物型

               

5、血清學鑒定：

1)間接血凝分型法：O因子血清分型        2)Lior玻片凝集法：H或K因子分型