致病性(致瀉性)大腸埃希氏菌及其檢驗（上）

致病性(致瀉性)大腸埃希氏菌及其檢驗
Examination of diarrheogenic Escherichia coli

•        條件性致病菌(opportunistic pathogen)

•        致病性大腸埃希氏菌 是指能使人、動物(esp.嬰兒和幼齡動物)感染及人食物中毒的一群大腸杆菌。

•        致病性大腸埃希氏菌屬主要分為五大類：

1、產腸毒素大腸埃希氏菌(ETEC)                   2、腸道侵襲性大腸埃希氏菌(EIEC)

3、腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)                 4、腸道出血性大腸埃希氏菌(EHEC)     O157:H7

5、腸粘附性大腸埃希氏菌(EAEC)

致病大腸埃希菌種類

菌株	侵襲部位	疾病與症狀	致病機製
ETEC	小腸	旅行者腹瀉、嬰幼兒腹瀉、水樣便、腹痛等	LT、ST
EPEC	小腸	嬰幼兒腹瀉、水樣便發熱、嘔吐	病菌黏附、破壞細胞
EIEC	結腸	誌賀樣腹瀉，膿血便	黏附、內毒素破壞細胞
EHEC	結腸	出血性結腸炎等	誌賀樣毒素(VERO毒素)
EAEC	小腸	嬰兒腹瀉、水樣便、脫水	黏附、毒素

 

•        致病性大腸杆菌與非致病性大腸杆菌在形態、培養特性及生化特性上是不能區別的，隻有用血清學方法按抗原性質來區分。致病性大腸埃希氏菌的致病性是一個很複雜的問題，也並非由某一方麵的因素所決定。

腸外感染：多為機會感染，表現為泌尿係感染(多見)，膽囊炎、腹膜炎等。

腸內感染：由致病大腸埃希菌引起，表現為腹瀉。

一、生物學特性

1．形態與染色特性

菌體兩端鈍圓，中等大小，杆狀(有時呈卵圓形)；1～3µm X 0.6µm；周生鞭毛，能運動；不產生莢膜，無芽孢；革蘭氏陰性。有時兩端著色較濃，要與巴氏杆菌區分開來。

2．培養特性

1)需氧及兼性厭氧菌

2)對營養要求不高，在普通瓊脂上生長良好，在15～45℃範圍內均可生長，最適生長溫度37℃，最適pH為7.2～7.4。

3)在普通瓊脂平板上可形成圓形、凸起、光滑、濕潤、半透明、邊緣整齊、中等大小的菌落。與沙門氏菌菌落較相似，但是，大腸杆菌菌落對光(45角折射)觀察可見熒光。

4)在普通肉湯中18～24h均勻渾濁，而後底部出現粘性沉澱物，並伴有臭味。能形成菌膜。

5)部分菌落可出現β溶血。

6)遠藤瓊脂：帶金屬光澤的紅色菌落

7)S．S瓊脂：多不生長，少數生長的細菌，也因發酵乳糖產酸而形成紅色菌落

8)伊紅美蘭(EMB)瓊脂：紫黑色菌落，有的有金屬光澤

9)麥康凱瓊脂：菌落呈紅色

3．生化特性

1)可發酵多種碳水化合物產酸產氣，不典型菌株不發酵或遲緩發酵乳糖。2)對蔗糖，衛矛醇、水楊苷發酵結果不一致。3)大多數菌株對賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸有脫羧基作用。4)不產生H2S，不液化明膠，不分解尿素。5)不能在氰化鉀培養基上生長，靛基質試驗陽性，V-P試驗陰性，不利用枸櫞酸鹽。此為典型的大腸埃希氏菌特性。

IMViC試驗： I：吲哚(靛基質)試驗，  M：甲基紅試驗，Vi：V-P試驗， C：枸櫞酸鹽利用試驗

典型大腸杆菌IMViC試驗為+、+、-、-。如IMViC試驗為+、+、-、-，且乳糖發酵，表明被檢物已有糞便汙染，有發生腸道傳染病的危險，這是衛生細菌中常用的檢測指標。

 

表5—20  大腸杆菌的主要生化特性

注：+陽性；  －陰性；  d有不同的生化型；  +/-多數陽性，少數陰性； (+)/-多數遲緩陽性，少數陰性；  ×遲緩不規則陽性或陰性

 

4.血清學特性    大腸埃希氏菌的抗原構造主要由菌體抗原(O)，鞭毛抗原(H)和莢膜抗原(K)三部分組成。

1)O抗原  每一血清型隻含有一種O抗原。本菌已發現有170種O抗原，分別以阿拉伯數字表示。

2)H抗原  一種大腸埃希氏菌隻有一種H抗原，無鞭毛則無H抗原。H抗原共有64種。

3)K抗原  又稱包膜抗原。共有103種。

•        新分離的大腸埃希氏菌70％具有K抗原。根據耐熱性可把K抗原分為A、B、L三類，B抗原與L抗原均可在煮沸後被破壞，A抗原耐熱性強，可耐受煮沸1小時而不被破壞。致病性大腸埃希氏菌的抗原主要為B抗原，少數為L抗原。

•        根據O抗原可將大腸埃希氏菌分成若幹血清群，再根據K抗原和H抗原進一步分為若幹個血清型或亞型。根據大腸埃希氏菌抗原的鑒定結果，寫出其抗原式，如O111：K58(B)H12。一般認為H抗原與致病性無關，因此，一般不需要進行H抗原的鑒定。

5.抵抗力   抵抗力中等，各菌型之間存在差異。此菌對青黴素有中等抵抗力，對一般消毒劑都比較敏感。對氯尤為敏感，水中遊離氯達到0.2 mg/L時，即可殺死此菌。此菌在土壤中、水中及糞便中可存活數月以上 。

6．毒素特性    有些大腸埃希氏菌產生腸毒素。

1)不耐熱腸毒素(heat-labile enterotoxin，LT)：化學成分為蛋白質，分子量較大，具有免疫原性。60℃ 30分破壞。可引起腸道分泌增加，出現腹瀉。

2)耐熱腸毒素(heat-stable enterotoxin，ST)：分子量較小，無抗原性。100℃ 30分鍾仍有活性。可引起腸分泌增加。