大腸菌群MPN的其它檢驗方法

1. 疏水網膜法(hydrophobic  grid-membrane filter, HGMF)   加拿大的Sharp AN博士等(1974)首次報道。其基本原理是：以疏水物質在5cm2、孔徑為0.45µm的濾膜上，橫豎各刻印40條線，將濾膜分為1600個小格，以疏水線作為柵欄，防止菌落擴散。樣品稀釋液首先通過5µm的前濾器過濾，再通過0.45µm的HGMF濾膜過濾，然後根據所需檢驗菌的特性，將濾膜置於不同的選擇培養基上培養24h～48h，陽性菌落即可通過顯色而進行鑒定，如果是大腸菌群則呈藍色。根據陽性菌落數查“陽性菌落數與單位生長最近似值換算表”即可得出單位樣品中大腸菌群的MPN。

本法可在24h～30h得出結果，大腸菌群準確率為100%，無假陽性。

該法的優點在於：隻使用單一的稀釋度，大大減少了檢驗過程中的隨機誤差和係統誤差；在過濾時除掉了所含的一些固體物質，及一些不利於細菌生長的可溶性物質，便於細菌的生長；因為濾膜先在營養瓊脂上培養4h～5h，再轉移到選擇性培養基，使受傷細菌得以恢複，因此縮短了檢出時間，提高了靈敏度。

2. TTC顯色法   該法使用的是含有TTC(氯化三苯四氮唑)的乳糖發酵培養基，接種方法與常規法相同。接種後於35℃～37℃培養18h～24h，觀察TTC乳糖培養基的顯色和產氣現象來判斷大腸菌群，然後根據陽性管數，查大腸菌群MPN檢索表，報告大腸菌群數。

3. DC半固體試管法   該法是將檢樣稀釋成3個稀釋度，分別接種於含有DC(去氧膽酸鈉)的半固體培養基中，充分混合，待凝固後，放入37℃溫箱內培養18～24h，根據培養基的顏色和有無氣泡的產生或瓊脂崩裂現象來判斷大腸菌群，並根據陽性管數查MPN檢索表報告大腸菌群數。