阪崎腸杆菌的生物學性狀與健康危害（上）

摘  要：阪崎腸杆菌是腸杆菌科的一種，1980年由黃色陰溝腸杆菌更名為阪崎腸杆菌。阪崎腸杆菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血症， 死亡率高達50％以上。目前， 微生物學家尚不清楚阪崎腸杆菌的汙染來源，但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的 主要感染渠道。 阪崎腸杆茵的生物學性狀及其對人群的健康危害受到人們的關注並被報告。 

關鍵詞： 腸杆菌， 阪崎；嬰兒食品； 食品微生物學；嬰兒，新生；腦膜炎；結腸炎

 

阪崎腸杆菌 (E．sakazakii)是人和動物腸道內寄生的一種革蘭陰性無芽孢杆菌，作為腸 杆菌科的一種，一直被稱為黃色陰溝腸杆菌( Enterobacter  cloacae)，直到1980年才更名為 阪崎腸杆菌， ^［1］該菌是腸道正常菌叢中的一種，在一定條件下可引起人和動物致病。1961年，Franklin等首次報道了2例由阪崎腸杆菌引起的腦膜炎病例。以後相繼在世界範圍內 (美 國、冰島、荷蘭等國家)報道了一係列新生兒阪崎腸杆菌感染事件。

阪崎腸杆菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和菌血症，並且可引起神經係統後 遺症和死亡，該菌感染引起的死亡率高達50％ 以上。  雖然現在還不能確定阪崎腸杆菌的 宿主和傳播模型，但在一些新生兒阪崎腸杆菌感染事件的調查中發現嬰兒配方粉是主要的感 染渠道。

 

阪崎腸杆菌作為腸杆菌科腸杆菌屬的一種， 在1980年之前一直被稱為黃色陰溝腸杆 菌。隨著對該菌認識的加深，根據阪崎腸杆菌與陰溝腸杆菌DNA．DNA雜交、生化反應、 色素產生和抗生素敏感性的不同，研究人員對該菌的分類提出了質疑。1976年Steigerwah等發現腸杆菌屬菌株可分為與“黃色素存在或缺失”相關的兩種不同的DNA雜交群。1977年Brenner等發現可根據D一山梨醇產酸和延遲產生脫氧核糖核酸酶 (Deoxyribonuclease,D Nase ) 區分產色素和不產色素的菌株。^［3］1980年Farmer 等^［1］建議對產黃色素的陰溝腸杆菌重新分類，在同一篇文獻中Farmer等指出通過DNA—DNA雜交他們發現阪崎腸杆菌之 間DNA一致性可達83％一89％， 而阪崎腸杆菌與陰溝腸杆菌的DNA共有序列隻有31％ 一49％。

1．1  培養特征  

阪崎腸杆菌兼性厭氧， 營養要求不高， 能在營養瓊脂、血平板、麥康凱 ( Mac Conkey，MAC) 瓊脂、伊紅美藍 (eosin  methylene  blue，EMB) 瓊脂、脫氧膽酸瓊脂等多種培養基上生長繁殖。

所有的阪崎腸杆菌都能在胰蛋白酶大豆瓊脂( trypticase  soy  agar，TSA) 上36℃快速生長，24 h 後形成直徑2～3 mm的菌落；25 ℃生長24 h 後形成直徑1 ～1．5mm的菌落， 48 h後形成直徑2～3mm的菌落。Farmer等發現阪崎腸杆菌在結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(violet  red  bile  glucose  agar，VRBG) 平板上首次劃線分離時，生長24 h後可生成2種或2種以上的菌落形態，一種幹燥或粘液樣， 周邊呈放射狀，用接種環觸碰可發現菌落極富彈性； 另一種是典型的光滑型菌落，極易被接種環移動。 目前， 尚不清楚這兩種不同的菌落是否存在毒力和其它表型上的差別。Farmer等發現在TSA平板上培養24 h 後， 所

有的阪崎腸杆菌都產生大量的沉澱物，像是包含團狀細胞和無定形組織 。  

 

 Muytjens 等研究了阪崎腸杆菌和相關菌株的酶反應特點。在對229株 (其中129株是阪崎腸杆菌) 細菌的研究中發現阪崎腸杆菌和其它腸杆菌之間存在兩個主要的不同：阪崎腸杆菌a-葡萄糖苷酶活性均為陽性，其它腸杆菌均為陰性(包括產氣腸杆菌(Enter obacter aerogenes )、 陰溝腸杆菌( Enterobacter  cloacae)、成團腸杆菌( Enterobacte agglomer ans))；所有試驗菌株中隻有阪崎腸杆菌缺少磷酰胺酶。1985年Farmer 等又檢測了57株阪崎腸杆菌，其中53株a -葡萄糖苷酶活性為陽性。由此認為，a-葡萄糖苷酶是用來快速區分阪崎腸杆菌和其它腸杆菌的可靠方法。1983年Aldova等^［6］評估了從捷克斯洛伐克分離的73株阪崎腸杆菌吐溫80脂酶的活性，結果顯示97．3％的菌株含有該酶。 1984年Postupa和 Aldova ^［7］研究了從奶粉和嬰兒配方粉中分離到的6株阪崎腸杆菌，發現所有的菌株在25℃和3 7℃培養7d 後都產生吐溫80脂酶。大量的研究結果表明，阪崎腸杆菌的生化反應 與陰溝腸杆菌相似( 表 1 ) 。   ^［3］在鑒定阪崎腸杆菌時需注意，該菌總是氧化酶陰性、D一山梨醇陰性、產生吐溫80脂酶、細胞外DNAse陽性並形成黃色菌落。

 

注 ： ( 1 ) +： 9 0 ％ ～1 0 0 ％陽性 ； (+) 7 5 ％ ～8 9 ％ 陽性 ； v ： 2 5 ％ ～7 4 ％陽

性 ； (一) ： 1 0 ％ ～2 4％陽性 ； 一： 0 ％ ～9 ％陽性 。

 

1．3抵抗力

Nazarowec-White等的早期研究認為嬰兒配方粉中阪崎腸杆菌的汙染與該菌的高度耐熱性有關。然而，Breeuwer等研究發現阪崎腸杆菌並非具有特殊的耐熱性，但能耐受一定程度的滲透壓和幹燥。無論是Nazarowec．White等還是Breeu．wer等人的研究結果都證明，阪崎腸杆菌的耐熱性不足以使該菌經標準的巴斯德消毒後幸存，產品的汙染很可能發生在幹燥和罐裝階段。與大腸埃希菌、沙門菌相比，阪崎腸杆菌對滲透壓和幹燥具有更高的耐受力，這很可能與細胞內大量的海藻糖酶有關。

 

Edelson．Mammel和Buchanan研究了人工汙染阪崎腸杆菌(根據生產商推薦的衝調方法， 配方粉稀釋液阪崎腸杆菌濃度約為106 CFU／m1 ) 的嬰兒配方粉長期存放時細菌的生存態。在將近一 年半中配方粉室溫放置在一個密閉的帶蓋瓶子中，定期從中取樣做定量檢測，在 最初的5個月內，阪崎腸杆菌活菌數量下降了2．5 log CFU／ml (從6．0 log CFU／ml下降 到3．5 log CFU／m1)，每月約下降0．5 log CFu／m l。隨後的1年內阪崎腸杆菌活菌數量 又下降了0．5 log CFU／ml，終濃度約3．0 log CFU／ml。該結果證明阪崎腸杆菌能在嬰兒配方粉中長期存活。^［2］ 

1．4 增殖能力

阪崎腸杆菌的傳代時間在6℃，21℃，37℃分別是13．7 h，1．7h，19～21mi n。對阪崎腸杆菌進行危險性評估發現，與本底相比，25℃放置6 h該菌的相對危險性可增加30倍；25℃放置10 h 可增加30000倍。

因此，即使嬰兒配方粉中隻有極微量的阪崎腸杆菌汙染， 在配方粉食用前的衝調期和儲藏期該菌也可能會大量繁殖。2004年2月FAO／WHO在日內瓦召開的嬰兒配方粉中阪崎腸杆菌專家研討會上提出嬰兒配方粉中微量的阪崎腸杆菌(<3 CFU／100g ) 汙染也能導致感 染的發生。 所以， 對奶粉和嬰兒配方粉的加工製作過程、家庭／醫院的滅菌過程以及嬰兒配方粉的儲存和食用等關鍵控製點進行嚴格管理，是減少該類產品潛在危險性的重點。

 

1.5 毒力 

 國際上對阪崎腸杆菌的毒力因子和致病性知之甚少。Pagotto等^［10］在2003年首 次描述了某些阪崎腸杆菌可能產生一種毒力因子一類腸毒素樣化合物。組織培養發現一些菌株可產生細胞毒效應。腹腔注射劑量達10⁸  CFU／隻時，18株試驗株均可在3d內導致哺乳期小鼠死亡。經口灌胃，隻有2株能引起哺乳期小鼠致死性損傷。SK92 ( 腸毒素陽性) 和 MNW6 (腸毒素陰性) 腹腔注射致死劑量最小而在最大口服劑量時仍不能引起小鼠的致死性 損傷。 由此看來， 阪崎腸杆菌之間的毒性存在明顯不同，而且，某些菌株可能是非致病性 的，這在某種程度上可能與細菌在胃的酸性環境中存活能力有關。