談厭氧菌檢驗的重要性及注意事項

[摘要] 目的：研究厭氧菌檢驗的重要性及注意事項。方法：結合臨床經驗，回顧性闡述厭氧菌檢驗的注意事項。結果：厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視。臨床感染的很多實例證明開展厭氧菌檢驗極為必要。結論：不同地區和不同醫院厭氧菌的耐藥譜不同，經驗用藥時要根據本地區和本實驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據藥敏試驗選擇藥物治療。

 

   

    厭氧菌是一類在無氧條件下比在有氧環境中生長好的細菌，這類細菌缺乏完整的代謝酶體係，其能量代謝以無氧發酵的方式進行。它能引起人體不同部位的感染，包括闌尾炎、膽囊炎、中耳炎、口腔感染、心內膜炎、子宮內膜炎、腦膿腫、心肌壞死、骨髓炎、腹膜炎、膿胸、輸卵管炎、膿毒性關節炎、肝膿腫、鼻竇炎、腸道手術或創傷後傷口感染、盆腔炎以及菌血症等。厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視，臨床感染的很多實例證明開展厭氧菌檢驗極為必要。

 

    1 厭氧菌檢驗概況

 

    過去我國厭氧菌培養在實驗室檢驗中開展的並不理想，臨床醫生重視程度不夠，大多數實驗室沒有將厭氧菌培養作為常規檢驗開展，加上厭氧菌培養方法學落後，且受培養基的配製和保存的限製，製約了厭氧菌培養在實驗室中的正常開展，造成厭氧菌的漏檢率很高。據報道[1]，我國從未開展過厭氧菌培養的實驗室占77%之多，有90%的實驗室沒有鑒定厭氧菌的設備，幾乎所有臨床細菌室均不開展厭氧菌藥敏試驗。近年來，國內從臨床感染病例中分離出厭氧菌的報道日益增多，臨床醫生已認識到厭氧菌在感染性疾病中的重要性，並能識別厭氧菌的重要特征，能認真、正確地采樣、送檢，且隨著厭氧菌培養技術的不斷進步，厭氧菌檢驗已成為臨床細菌學檢驗的重要組成部分。為提高感染性疾病的病原學診斷水平，開展厭氧菌培養是非常必要的。據資料顯示，如僅做需氧菌培養，在23份漏檢標本中檢出9株厭氧菌，這說明在做細菌需氧菌培養的同時應做厭氧菌培養[2]，否則將會造成大量病原菌漏檢，它不僅關係到疾病診斷的正確性，且影響治療效果或導致治療不徹底。

 

    2 厭氧菌檢驗的注意事項

 

    2.1 標本選擇

    根據厭氧菌感染的臨床特征，選擇感染局部有氣體產生，排出物有惡臭、帶血、呈黑色或黃綠色，與腫瘤有關的感染，病程呈亞急性或慢性，發生在肛周、口腔、鼻竇、咽頰等部位的感染，長期使用氨基糖苷類抗生素無效者和應用甲硝唑及替硝唑治療有效者。

 

    2.2 標本送檢

 

    大氣中的氧對厭氧菌有毒性作用，任何標本建議采用床邊接種的方法，床邊接種既能縮短標本接觸空氣的時間，又能較好地把好標本的質量關。不在床邊接種的標本必須立即放入輸送培養基中並馬上送檢。

 

    2.3 檢驗人員的責任心

 

    檢驗人員對厭氧菌標本要加倍重視，積極配合臨床，主動到床邊采集標本。厭氧菌培養成敗的關鍵在一個快字，標本采集後要馬上接種並放置於厭氧環境，對厭氧菌培養標本要做到標本到手後馬上處理。厭氧菌生長物特別惡臭，所以觀察結果時檢驗人員要不怕臭，仔細觀察，多挑選可疑菌落做耐氧試驗，這樣才能成功地分離出厭氧菌。

 

    2.4 標本塗片檢查

 

    在對標本做厭氧菌培養的同時進行塗片鏡檢，可早期把有厭氧菌生長的信息提供給臨床，如普通需氧培養無細菌生長，但直接塗片見到大量細菌者，即可考慮為厭氧菌感染；如普通培養隻有一種細菌生長但直接塗片可見2種或2種以上細菌者，可考慮患者為混合感染，這樣可早期指導臨床診斷，避免盲目用藥造成耐藥菌株產生，又可解決厭氧菌培養和藥敏周期長的弊端。

 

    2.5 培養基的選擇和培養環境

 

    初代接種厭氧菌最好使用新鮮配製的培養基，還可適當選用一些選擇培養基，培養基使用前須進行預還原。培養環境選用厭氧袋或厭氧罐，兩種方法價廉且操作簡易；厭氧箱設備昂貴，操作複雜，不利於臨床實驗室的使用。目前，厭氧菌培養用OxyplatesTM培養法較好[3]，它無需其他厭氧裝置，它的劃線和培養在一個標準的厭氧培養基中，且能被反複打開使用多次，無須預先還原，便於實驗室的使用，這種培養方法省去了厭氧罐、厭氧袋、厭氧箱等複雜、昂貴的消耗品，又能較好地分離出厭氧菌。

 

    厭氧菌的鑒定可選用API 20A、VITEK-ANI、MICRO-01D、氣液色譜儀等設備鑒定。厭氧菌的藥敏試驗，大部分實驗室采用美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)推薦的瓊脂稀釋法[4]，該方法實用性強，適用於大量菌株的測定，有的實驗室使用濃度梯度法(Etest)或ATB-ANA試條的方法，操作簡便、快速。

 

    3 厭氧菌感染的治療

 

    厭氧菌感染的治療除針對原發病外，抗厭氧菌的治療最為重要。替硝唑和甲硝唑對大多數厭氧菌感染治療有效，故成為目前臨床上抗厭氧菌的首選藥物。由於多數厭氧菌感染是混合感染，聯合使用抗厭氧菌和需氧菌藥物是非常必要的。由於不同地區和不同醫院厭氧菌的耐藥譜不同，經驗用藥時要根據本地區和本實驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據藥敏試驗選擇藥物治療。

 

    [參考文獻]

 

    [1]張秀珍.要加強我國臨床細菌室厭氧菌的培養技術[J].中華檢驗醫學雜誌,2002,25(3):133-134.

    [2]儲從家,孔繁林,羅次節,等.同時做需氧厭氧培養提高血(體)液細菌培養陽性率[J].中華檢驗醫學雜誌,2002,23(5):285.

    [3]吳多榮.氧淨(OxyplatesTM)厭氧菌培養法的實驗室應用[J].中國熱帶醫學,2004,4(4):617-619.

    [4]Ptrick R.Manual of clinical microbiology[M].7th ed. Washington DC: ASM press,1999.1555-1560.