1、建立小型家庭組織培養室,自製設備。眾所周知該項工作要在無菌條件下進行。為此,必須研製密封良好的玻璃接種箱、淨化空氣裝置,采取種種技術措施,以降低轉瓶汙染率。用酒精噴霧降塵,成功率上升為92%,這就給篩選最佳培養基配方贏得了時間,奠定了良好的基礎。
2、無菌操作。所有接觸培養基、能耐高溫的器 用幹熱法(140~150OC)處理,對不耐高溫的器具采用化學方法滅菌消毒。為解決接種時需要在火焰上進行的問題(因箱內幾乎無空氣),增添了一隻300瓦的電爐,但因溫度高易灼壞外植體,故又加設了通風降溫的設施。為了減少刀具第二次在環境中汙染,高溫消毒後安放在一端封閉的筒內,同時不斷鼓入淨化的空氣加以冷卻,確保外植體安然無恙地進入營養基瓶中。所有進入箱內的物品均需酒精消毒後才放進,凡是帶菌者不許入箱。箱體消毒程序是酒精噴霧後紫外線消毒,並定期用甲醛加高錳酸鉀進行熏蒸.。
3、選用適宜的培養基配方。誘導一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、細胞分裂素。但不同的生長階段還需做成分上的調整,特別是生根時,由於蘭花生根較其他品種花卉難些,故采用高濃度的NAA浸泡數秒的做法,效果良好。
4、外植體的采取、消毒。外植體以長根的幼苗(未展開葉),隨采隨接種,成活率較高(接種時節以10月至次年2月最好)。外植體消毒,筆者采取0.1升汞加0.1%濃鹽酸多次消毒的辦法,效果更佳。
5、培養環境。光照1000~2000勒,10~16小時,培養溫度26OC±2 OC,空氣溫度應控製在較低的水平(70%~80%),否則極易再一次汙染。
①、在家庭中建立小型組培室是可行的,它的投資少(可充分利用家中的條件)。從籌備到進行實驗隻花去數百元,該實驗設備也可用於開展其他品種(如木本、藥用植物等)的研究工作。
②、無菌操作必須從思想上重視,操作上謹慎才是,否則損兵折將,後果不堪設想。
③、若無實體顯微鏡,隻能做以芽生芽的實驗。采取一些措施如分期切製切樣品、液體加旋轉床的方案,是取得大批量類原球莖的一種途徑,其繁殖速度也會有所突破。
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