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怎樣在家庭開展組培工作



錄入時間:2011-4-14 13:35:11 來源:中國組培網

製備
家庭組培因受到條件的限製,不可能配置大量的配養基,,一般每次配置1升為宜。煮製後用PH試紙測定後,分裝成35-40瓶,塞好棉塞,包好包頭紙。(棉塞一定要用作棉衣的棉花卷製,不能使用脫脂棉,然後用紗布包緊,用棉線紮好。棉塞的鬆緊以手提棉塞瓶子不滑落為宜。)然後放入高壓鍋裏高壓滅菌,待高壓鍋噴嘴噴出蒸汽時,扣上壓力閥,從壓力閥噴氣時起計時,連續維持15-20分鍾後關火,壓力消失後,打開鍋蓋,取出配養基,放入接種箱內待用。初次實驗時,滅菌後的培養基應放置三五天後,觀察無黴菌生長時才能使用。如有黴菌長出,這說明滅菌時間不夠,,需要適當增加滅菌時間。
 
 
接種
將滅菌後的配養基、無菌水、消毒藥水及使用的器材放入接種箱內,因接種箱內的體積相對較小,所以所用的一切物品都要有序地擺放在相應的位置上,不能隨意擺放,箱內濕度較大,點酒精燈一定要是用打火機,不要使用火柴。要特別注意準備好裝汙水、汙物的容器,盡可能地大一些,因為操作時是不容許開箱取物的。把所有的物品放置好以後,將一裝有10-20ml福爾馬林的磁杯放入箱內(最好不要使用玻璃杯,因反應時溫度較高,容易炸裂。),倒入2-5g高錳酸鉀(PP粉),使其蒸氣充滿箱內,達到滅菌的效果。這時要將接種箱的通氣孔和操作孔封閉好,避免甲醛蒸氣很快散盡。待箱內蒸氣散盡後,才能開始接種工作,這段時間大約需要5-10個小時。
 
接種時,揭去密封在接種箱通氣孔和操作孔上的密封物,取出熏蒸用的磁杯,將接種用的材料送入接種箱內,開啟紫外線燈,十五分鍾後關閉紫外線燈,開啟照明燈,即可開始工作。操作時一定要樹立無菌觀念,要把一切物品都看成是帶菌的,要時時都注意防範。工作是由於箱內溫度較高,濕度較大,手容易出汗,所以每接種一瓶後都要用酒精擦拭手指,也可以戴指套。另外,操作時要注意防火,由於空間較小,一不小心就容易燒傷手指或引起酒精起火。打開瓶塞時,要將瓶口置於酒精燈上方,用右手的無名指和小指夾住棉塞尾,輕輕將棉塞拔出,棉塞不能置於箱內物品上,應用手指夾住,接種後,將瓶口在酒精燈上燒灼一下,棉塞也燒灼一下,,然後在酒精燈火焰上方輕輕塞好,紮好包頭紙,用鉛筆標明品種、接種日期、編號等,然後重複下一瓶。
其實,用接種箱接種與超淨工作台相比較,工作時人要感覺舒適得多。汙染率也是很低的,操作熟練後幾乎沒有什麽汙染發生。接種後愈傷組織分化、小苗分化、生長狀態與在超淨台上接種的沒有什麽兩樣。
 
 
培養
在家庭的業餘條件下培養培養的條件不可能得到專控,所以要充分的利用自然條件,接種後的培養瓶可以放在有較強散射光的地方,如靠窗的書櫃、寫字台上,但要避免日光直射,一般室溫在22-28攝氏度時都能正常生長,不是特殊的品種不需要特殊的護理。如室溫太低,可以用紙板、木條、塑料薄膜做一個簡單的培養箱,裏麵裝一兩個15-25瓦的白織燈,既可以補助光照也可以提高培養的溫度。夏天溫度過高時,有條件的可以擺放在空調室內,,沒有空調室的,降溫雖然困難一些,但大多數試管苗是可以耐受的,不至於死去。小苗長出後,擺放在書櫃或工作台上,感到自己培養出來的生機勃勃的小生靈,無疑是一種享受。
 
栽培
當小苗長到一定的時候,就可以配置一些生根配養基將小苗轉移培養生根,待長出一定根係時,就可以出瓶種植了。小苗出瓶種植的時候一定要注意以下幾個方麵,一是要適當降低溫度;二是要增大濕度;三是要嚴格控製雜菌危害;四是要保證種植介質的疏鬆透氣;五是要保證適當的光照。我通常是用蹠石、木屑、稻穀殼混合作基質,把小苗種植後用百菌清噴霧澆根,蓋上塑料薄膜,少量的小苗幹脆用玻璃杯蓋住,大約15天後就能揭去覆蓋物,便可進行正常管理了。
 
家庭開展組培其實也並不是一件什麽很困難的事情,隻要多開動腦筋,多想一些辦法,做起來也是很容易地。萬事開頭難,辦法總比困難多。我1974年在一個縣烤煙研究所裏當所長,原來條件不允許,科研經費很緊張,剛開始的時候,一年的科研經費隻有3000元,那年我做過煙草的花藥單倍體、水稻花藥培養、柑桔胚乳培養、黑皮果蔗莖尖組織培養、田三七愈傷組織培養、黑節草(石斛)種子的無菌培養、體細胞融合,都獲得了很好的成績,我們就是用這種方法做的,當時北京、上海很多的研究單位來看了很吃驚,他們認為很珍貴的組培小苗,被我們丟得到處都是,覺的不可思議,他們做不出來的,竟然在我們一個十分閉塞的山區裏可以做出來。我說這個話的意思不是為自己吹噓擺功,而是告訴想從事這個行業的朋友,不要自己把自己的能量看得太低,也不要迷信權威、隻要自己有信心,嚴格地按照科學的規律去做,沒有什麽做不了的,沒有什麽辦不到的。

 

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