原理：有的細菌能把硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，而亞硝酸鹽能和對氨基苯磺酸作用生成對重氮基苯磺酸，且對重氮基苯磺酸與α-萘胺作用能生成紅色的化合物N-α-萘胺偶氮苯磺酸。
（一）適用於需氧菌的方法
培養基：
硝酸鉀（不含NO2-） 0.2g
蛋白腖 5g
蒸餾水 1000ml
溶解，調節pH至7.4，分裝試管。每管約5毫升，15磅高壓滅菌15分鍾。
試劑：
甲液 對位氨基苯磺酸 0.8g
5N醋酸溶液 100ml
乙液 α—萘胺 0.5g
5N醋酸溶液 100ml
方法：接種細菌後37℃培養4天，沿管壁加入甲液二滴與乙液二滴，當時觀察。陽性者立刻呈紅色。
（二）厭氧菌硝酸鹽培養基法
培養基：
硝酸鉀（不含NO2-，化學純） 1g
磷酸氫二鈉 2g
葡萄糖 1g
瓊脂 1g
蛋白腖 20g
蒸餾水 1000ml
加熱溶解，調整pH至7.2，過濾，分裝試管，15磅高壓滅菌15分鍾。
方法：接種後作厭氧培養，試驗方法和結果觀察同上法，但培養1～2日即可。
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