原理：細菌分解蛋白腖中的色氨酸，生成吲哚（靛基質），經與試劑中的對位二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚。
培養基：鄧亨氏蛋白腖溶液
試劑：常用下述兩種。
1．歐立希氏（Ebrlich′s）吲哚試劑
對位二甲基氨基苯甲醛（P-dimethyl aminobenzaldehyde） 1g
純乙醇 95ml
濃鹽酸 20ml
先以乙醇溶解試劑，後加鹽酸，要避光保存。
2．Kovacs試劑
對位二甲基氨基苯甲醛 5g
戊醇（聚異戊醇） 75g
濃鹽酸 25ml
方法：以接種環接種待試細菌的新鮮斜麵培養物於鄧亨氏蛋白腖溶液中， 37℃培養24～48小時後（可延長4～5天）。於培養液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，搖勻，靜置片刻後，沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下麵的液體變紅色者為陽性反應。
也可將一指頭大的脫脂棉，滴上兩滴歐立希氏試劑，再在同處加滴兩滴高硫酸鉀（K2S2O4）飽和水溶液，置於含培養液的被檢試管中，離液麵約半寸，置燒杯內水浴煮沸為止，脫脂棉上出現紅色為陽性。此法略繁，但省試劑且準確，因為將試劑加到液體中，吲哚和糞臭素均呈陽性，而用此法，隻是吲哚（它能揮發）呈陽性反應。
亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10％濃HCl溶液，然後以接種環刮取一環瓊脂的純培養物塗布於該濾紙上。
細菌塗印周圍呈藍色者為陽性，細菌塗印周圍無色澤變化或淡黃色者為陰性。
厭氧菌用蛋白腖水
蛋白腖 20g
葡萄糖 10g
硫乙醇酸鈉 1g
Na2HPO4（無水） 2g
瓊脂 1g
蒸餾水 1000ml
加熱溶解，調整pH至7.4～7.6，過濾，分裝小試管，15磅高壓15分鍾。
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