【摘要】 目的 了解浦東新區健康人群
【關鍵詞】 健康人；大腸埃希菌；耐藥性
【Abstract】 Objective To study the prevalence of drug-resistance of E.coli in Pudong New Area.Methods Identify the isolates with VITEK，test their drug-resistance with K-B method and then interprete the result according to National Committee Clinical Laboratory Standards (NCCLS) guidelines. Results The drug-resistance of E.coli in the entestine of healthy people is prevail. About 96%(192 of 200)of tested isolate are multi-drug resistance.(resisting to at least 2 types of antibiotic drug). In the 17 biochemical-drug tested，streptomycin，tetracycline are highly resistant，while the drug-resistance rates to cefozolin，cefoxitin，cefotaxime，chloramphenical，imepenem，nitrofurantoin，tobromycin，amikacin，spectinomycin are very low. Conclusion The E.coli in the entestine of healthy people in Shanghai Pudong New Area is strongly multiresistant to an array of antibiotics. It is of major importance for the public health policy to control the abuse of antibiotics in human beings as well as in food animals.
【Key words】 healthy people；E.(Escherichia)coli； drug resistance
細菌耐藥現象已經成為全世界臨床醫生和微生物學家關注的問題，多重耐藥菌引起的感染使治療難度大大提高。由於我國在人群和動物中廣泛存在抗生素的不合理使用現象，健康人體內的正常菌群也可能出現耐藥。
1 材料
1.1 麥康凱平板、MH肉湯、MH瓊脂培養基、氧化酶試劑、革蘭染色試劑。
1.2 VITEK32（生物梅裏埃公司），革蘭陰性杆菌（GNI）板條（生物梅裏埃公司）。
1.3 藥敏紙片（上海市疾病預防控製中心）。
2 方法
2.1 收集健康人群糞便標本
樣本來源於從業人員健康體檢肛拭標本。為了使樣本具有代表性，在收集標本時，進行問卷調查，剔除長期使用抗生素者或由於任何原因在近3個月內使用過抗生素者，並將標本分類為上海本地人（包括在上海居住2年或2年以上的外地人）和外地人。
2.2 大腸埃希菌的分離培養
標本直接畫線接種於麥康凱平板，
2.3 大腸埃希菌耐藥性
檢測方法根據紙片擴散法（即K-B法）進行，結果判斷根據美國國家臨床實驗室標準委員會（NCCLS 2004）的規定，標準菌株為大腸埃希菌ATCC25922，金黃色葡萄球菌ATCC25923，銅綠假單胞菌ATCC27853。所檢測的抗生素包括阿莫西林、頭孢唑啉、頭孢噻吩、頭孢噻肟、阿米卡星、紅黴素、鏈黴素、亞胺培南、丁胺卡那黴素、呋喃妥因、氟呱酸、四環素、複合磺胺、妥布黴素、大觀黴素、甲氧葡胺嘧啶、慶大黴素等17種常用抗生素。
3 結果
3.1 健康人群腸道大腸埃希菌的耐藥現象非常普遍，200株大腸埃希菌中，僅有1株埃希菌對所檢測的17種抗生素均敏感，其它199株埃希菌對1種或1種以上的抗生素耐藥或中介耐藥。多重耐藥（耐藥數量≥2，中介耐藥計為耐藥）百分率為96%(192個)。有32％（64株）的被檢大腸埃希菌對5種或5種以上的抗生素耐藥，有12.5%(25株)的對7種被檢大腸埃希菌對7種或7種以上的抗生素耐藥。其中，有一株大腸埃希菌（132＃）對14種抗生素耐藥，僅對亞胺培南、呋喃妥因、大觀黴素3種抗生素敏感。
3.2 所檢測的17種抗生素中，紅黴素、鏈黴素、四環素均有很強的強耐藥性。其中，耐藥性最強的是紅黴素，耐藥率為98％(196株)，僅有2％（4株）大腸埃希菌敏感。其次是四環素，耐藥率為94.5％（189株）。對鏈黴素（80％），阿莫西林（37％），複方磺胺（35％），甲氧葡胺嘧啶(42%)的耐藥性也較高。氟呱酸（13.5％），慶大黴素（15.5％）有也一定的耐藥性。據統計，耐藥性較低的幾種抗生素為頭孢唑啉（3％）、頭孢噻肟（2%）、頭孢噻吩（9％）、氯黴素（7.5％）、亞胺培南（0）、丁胺卡那黴素（0.5％）、呋喃妥因（1％）、妥布黴素（7％）、大觀黴素（0）。其中，亞胺培南、大觀黴素的敏感性為100％，丁胺卡拉黴素、呋喃妥因的敏感性分別為99.5％和99％。
3.3 耐慶大黴素的大腸埃希菌100％多重耐藥，且多數對數種抗生素耐藥。耐慶大黴素的大腸埃希菌中，有93.1％（29株中有27株）對5種或5種以上的抗生素耐藥，58.6％（29株中有17株）對7種或7種以上抗生素耐藥，高於對慶大黴素敏感的大腸埃希菌的21.6％和4.7％。見表1。表1 慶大黴素耐藥和慶大黴素敏感的大腸埃希菌多重耐藥比較 例(略)注：P＜0.01
3.4 實驗標本（200例）中，有72.5％（145例）上海本地人（將在上海連續居住2年或2年以上者歸為上海人），27.5%（55例）來自外地。對2種或2種以上的抗生素耐藥的比率，外地人為98.2％(54例)，高於上海人為95.1％（138例），對3種或3種以上抗生素耐藥的耐藥率，外地人為57.4％（31例），高於上海本地人的43.8％（63例）。
4 討論
抗生素耐藥性問題已成為全世界臨床微生物學家關注的焦點，而我國是全世界濫用抗生素最為嚴重的國家之一，據報道，我國80％的住院病人，都使用過抗生素，其中，89％是經驗用藥。由於抗生素的不合理使用，細菌已產生了非常嚴重的耐藥性，甚至於有人認為，我國將進入“後抗生素時代”，即無藥可治的年代。據統計，住院感染患者耐藥菌引起的醫院感染人數，已占到人數的30％左右。那麽，耐藥性對健康人的影響程度如何，普通人群中體內的正常菌是否也具有耐藥性，其耐藥程度如何？我們不得而知。
我們知道，腸道大腸埃希氏菌中許多菌株攜帶有可傳播的質粒，耐藥性可通過這些質粒同種或異種細菌之間傳播，它不但可使原先敏感的正常菌群獲得耐藥性，而且可使原先敏感的致病菌獲得耐藥性。此外，正常人不斷排出具有耐藥性的大腸埃希氏菌，可通過環境汙染在人群之間傳播。因此，研究健康人群腸道大腸埃希氏菌耐藥性，可了解目前由於抗生素的不合理使用在整個健康人群中的影響，同時對大腸埃希氏菌感染的抗生素經驗治療，控製感染性疾病及細菌性傳染病具有重大指導意義。
本研究顯示，上海市浦東新區健康人腸道大腸埃希菌對多種抗生素具有較強的耐藥性，200株大腸埃希菌中，對所檢測的17種抗生素均敏感的菌珠僅為0.5％（1例），而多重耐藥率高達96％（192例），甚至發現對14種抗生素耐藥的細菌。耐藥性最強的幾種抗生素為紅黴素（98％）、鏈黴素（80％）、四環素（94.5％），耐藥性均達80％以上，而阿莫西林（37％）、複方磺胺（35％）、甲氧葡胺嘧啶（42％）的耐藥性也較高，已失去了經驗用藥的價值。較為敏感的幾種抗生素是頭孢唑啉（3％）、頭孢噻肟（2％）、頭孢噻吩（9%）、氯黴素（7.5）、亞胺培南（0）、丁胺卡那黴素（0.5％）、呋喃妥因（1％）、妥布黴素（7％）、大觀黴素（0），其中，無一例對亞胺培南、大觀黴素兩種抗生素耐藥。這些結果與臨床分離的大腸埃希菌的藥敏結果［1］基本吻合，但略有不同。
有研究認為［2］，耐慶大黴素是篩選多重耐藥大腸杆菌的唯一準則，因為95%的耐慶大黴素的大腸菌是多重耐藥菌，而且沒有一株多重耐藥大腸杆菌對慶大黴素敏感。本研究顯示，耐慶大黴素的大腸埃希菌100％多重耐藥，且多數對數種抗生素耐藥。有93.1％（29株中有27株）的耐慶大黴素的大腸埃希菌對5種或5種以上的抗生素耐藥，58.6％（29株中有17株）對7種或7種以上抗生素耐藥，高於對慶大黴素敏感的E.coli的21.6％和4.7％，說明慶大黴素耐藥和多重耐藥之間可能存在某些聯係，對慶大黴素耐藥的Ecoli
本研究顯示，外地人腸道大腸埃希菌的耐藥性較浦東本地人高，這可能是由於浦東經濟較發達，在控製抗生素濫用方麵相對較嚴格。
正常人大腸埃希菌產生耐藥性的原因：抗生素的不合理使用；耐藥基因在同種和異種細菌間的傳播；食品中抗生素的殘留。一些抗生素，如紅黴素、四環素，由於已經使用了相當長的一個時期，耐藥性已廣泛存在，並且，由於其較強的毒副作用，近幾十年來，臨床上已很少使用，但本研究仍然顯示很強的耐藥性。分析原因可能有二：一是耐藥性一旦出現，很難消除［2，3］，二是這些被淘汰的抗生素，由於價格低廉，廣泛地用於家禽家畜的促生長劑及預防和治療用藥，在家禽家畜體內大量蓄積，人食用這些食品後，產生耐藥性。據報道，食用動物體內大腸菌耐藥現象十分嚴重［4］，這些耐藥性可能通過水平傳播傳遞給人類的腸道菌。控製抗生素的濫用，包括在人類和食用動物中的濫用，製定相關的監督機製，是我國公共衛生政策的當務之急。
耐藥性在細菌與細菌間的水平傳播，由於速度快，範圍大，是細菌產生耐藥性的重要原因，也是臨床微生物學家關注的焦點。據報道，從未接觸過抗生素的細菌，也可能產生耐藥性，這種耐藥性來源於耐藥基因的水平傳播。目前研究的較多是整合子。健康人群間耐藥性通過基因水平傳播的機製，是筆者要進一步研究的課題。
作者：白雲，李婷，吳紅岩，沈小明，趙冰，楊玲鳳，陸嵐，《中華醫藥雜誌》
【參考文獻】
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2 Maurine A，Leverstein-van Hall，Adrienne T.A. Box，et al. Evidence of Extensive Interspecis Transfer of Intergron-Mediated Antimicrobial Resistance Gene among Mutidruge -Resistant Enterobacteriaceae in a Clinical Setting. J of Infections Diseases，2002，186：49-56.
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