原理：某些細菌能從葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇（Acetymethyl carbinol）→2，3-丁烯二醇（2，3-bytaylene cylycol），在有堿存在時氧化成二乙酰，後者和腖中的胍基化合物起作用，產生粉紅色的化合物。
培養基：含葡萄糖、K2HPO4、蛋白腖各5g，完全溶解於1000ml水中後，分裝試管內，間歇滅菌或10磅10分鍾滅菌。
方法：
1．O’Meara’s法
試劑：40g氫氧化鉀溶於100ml蒸餾水中，加入0.3g肌酐即成。
將被檢細菌接種於葡萄糖蛋白腖水培養後，於35～37℃培養48小時，於每毫升培養物中加入0.1ml，猛烈搖振混合。
2．Baritt’s法
試劑：6％α-奈酚酒精溶液為甲液，40％氫氧化鉀為乙液。
同上法接種培養細菌，於2ml培養液內加入甲液1ml和乙液0.4毫升，搖振混合。
試驗時強陽性者約於5分鍾後，可產生粉紅色反應（長時間無反應，置室溫過夜），次日不變者為陰性。
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