小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗(1)

小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica）廣泛分布於自然界，是一種人畜共患的病原微生物，對人以腸道感染為主，並可成為各種疾病的病原。在食品和飲水等受到本菌汙染時，往往可引起人的胃腸炎暴發，其症狀表現與沙門氏菌食物中毒相似。檢驗以檢出該菌為主，用生化和血清學進行鑒定。該菌生長的最適溫度為22~29℃，但它可在0~4℃發育，為嗜冷性致病性細菌，因此，應特別引起注意的是，如被該菌汙染的食品，雖在低溫保存，但不能防止其生存和繁殖，這與其他腸道致病菌所不同。

為加強食品衛生管理，必須提高對該菌的檢驗技術，建立和完善檢驗方法，根據實際應用，對該菌檢驗在原國家標準方法中所發現的問題進行了試驗研究後，對一些檢驗項目作了改進，提出了本修訂方法，以代替原GB 4789.8－84。

 

 

一、檢驗方法

　

　　（一）操作步驟

　　1. 樣品采集和處理：與沙門氏菌食物中毒采集和處理相同。

2. 增菌培養：將食品校品接種到改良磷酸鹽緩衝液中，增菌液以1:10的比例混合，置4℃冰箱進行冷增菌。

3. 堿處理：取肉及其製品等的冷增菌液0.5mL與堿處理液4.5mL混合15s。

4. 分離培養：將冷增菌液和堿處理的冷增菌液分別接種CIN-I和改良y培養基，培養於26℃48h後，在CIN-I平板上挑取紅色牛眼狀菌落。在改良y培養基上挑取無色透明不粘稠的菌落，進行進一步鑒定。

5. 改良克氏雙糖試驗：將上述可疑菌落接種到改良克氏雙糖管中，於26℃、24h培養，將斜麵和底部皆變黃者做進一步生化鑒定。

6. 尿素酶試驗和動力觀察：將改良克氏雙糖上的可疑培養物接種到尿素培養基上，注意接種量要大，挑取一接種環，振搖數秒鍾，放置26℃培養2~4h，然後將陽性者接種兩管半固體，分別放26℃和37℃溫箱，培養24h檢查，如在26℃有動力者，可進行鏡檢和進一步生化試驗。

7. 染色鏡檢：將上述可疑菌落做塗片染色，進行顯微鏡觀察，呈革蘭氏陰性球杆菌，有時呈橢圓或杆狀，大小為0.8~3.0μm×0.8μm者做進一步生化檢驗。

8. 生化試驗：將上述可疑菌落做下列主要生化試驗與其他相似細菌進行鑒別。

V-P試驗、鳥氨酸脫羧酶試驗，山梨醇、甘露醇、蔗糖、棉子糖、鼠李糖等發酵試驗。

所有以上生化反應皆為26℃培養。

9. 血清學鑒定：除進行生化學鑒定外，亦可做血清型別的鑒定。目前國內可生產27種O型血清因子，供各地使用，具體操作方法與沙門氏菌O因子血清分型相同。