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微生物實驗中常用藥品試劑配製——反應劑



錄入時間:2011-3-25 9:04:19 來源:水世界

(一) 反應劑
1、檢查葡萄糖試劑
 
配方一 本尼迪克(Benedict)溶液
(1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無水碳酸鈉。
(2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。
把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產生沉澱,要過濾。本尼迪克溶液配製後能長期使用(存放時間較久而產生沉澱是,取上層清液使用,不必重新配製)。
本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.15 ~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時,如果未知物中有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉澱物。
配方二 裴林(Fehling)溶液
(1)把34.5克硫酸銅溶於500毫升蒸餾水中。
(2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。
上述兩種溶液應分別保存。在檢測葡萄糖時,使他們等量的混合,加入待測物的試管內,加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉澱物。
 
2、檢查澱粉的試劑
魯哥氏(Lugol's)溶液(碘液)
取6克碘化鉀溶於20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解後,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶內。
碘液用來測試食物樣品或葉片中的澱粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細胞核等。
 
3、檢查蛋白質的試劑
配方一 倫(Millon)試劑
在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解後加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清後,取它上層的清液備用。這種試劑可長期保存。
在待測物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質,會出現紅色。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質。
配方二 雙縮尿試劑
分別配製10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。
在3毫升待測物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質,會出現紫色反應。
 
4、檢查脂肪的試劑
蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液
取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過濾後密閉在試劑瓶內保存備用。
 
5、酸堿指示劑
配方一 酚酞試劑和試紙
酚酞試劑 取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液裏,裝在試劑瓶內密閉保存。
酚態試紙 取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液裏,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕後,取出,放在無氨氣影響處晾幹。
酚泰試劑(試紙) pH值變色範圍8.2~10,在酸性和中性溶液中都無色,再堿性溶液中呈深紅色。
配方二 紅藍石蕊試紙
取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然後過濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現藍色為止。在上述製備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨後取出濾紙條,放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾幹,即的紅、藍兩種石蕊試紙。
紅石蕊試紙在堿性溶液中變藍,藍石蕊試紙在酸性溶液中變紅。
 
6、檢查二氧化碳的試劑
檢查二氧化碳的試劑,可用溴代麝香草酚藍溶液和石灰水。
配方一 溴代麝香草酚藍溶液
取0.1克溴代麝香草酚藍,溶解在100毫升蒸餾水裏,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍色。
溴代麝香草酚藍溶液pH值變色範圍是6.0(黃)~7.6(藍)。待測物中如果有二氧化碳,會形成碳酸而使溶液變成黃色。
配方二 石灰水
在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態時為止。在石灰水澄清後,傾出上層清液,用濾紙過濾,放在密閉瓶內保存。
如果測定的物質中有二氧化碳,會生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。
 
7、檢查細胞生活力的試劑
檢查細胞有無生活力,可用中性紅甲基藍試劑。配製的方法是先分別配製1%中性紅溶液和1%甲基藍溶液,這兩種溶液各取1份混合,用來鑒定細胞的死活。該試劑使活細胞的液泡染上紅色,而使死細胞全部染成藍色。

 

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