百合是世界上著名的切花品種之一,靠常規的小鱗莖分株方法繁殖,繁殖係數較低,1株百合每年隻能得到1～3個小鱗莖[1]。有些種類可用鱗片扡插繁殖,但往往容易腐爛。另外,百合長期靠營養繁殖,容易感染病毒病,而影響百合品質[2]。組織培養快速繁殖技術,能夠迅速去除病毒和更新品種,具有較高的經濟價值和開發潛力,因而得到廣泛的應用。近年來,很多花卉研究者進行了百合的組織培養繁殖研究,所選的外植體有珠芽、幼莖段、葉片、鱗片等[3 6],主要側重於不同外植體對百合成苗和脫毒效果的研究,而關於利用組培苗葉片基部進行快速繁殖和結鱗莖的研究,報道較少[7]。本試驗以組培苗葉片基部為材料,對影響百合成苗和結鱗莖的兩類主要激素進行了係統研究,省去了對外植體消毒處理的過程,減少了汙染機率,為將來大規模生產百合小苗和鱗球莖在理論和實踐上提供參考依據。
1 材料與方法
1.1 材料
采用的百合品種為麝香百合(Liliumlongi flornm Thumb),英文名字為Easterlily。
1.2 方法
取百合鱗片經消毒後,接種於MS培養基上,誘導叢芽體,叢芽體繼代擴增後,剝取叢芽葉片基部進行處理。
1.2.1 6BA和NAA處理 以MS為基本培養基,設計係列濃度的6 BA和NAA處理組合,6 BA(mg/L)為:0,0.5,1.0,2.0;NAA(mg/L)為:0,0.1,0.2,0.4。共16個處理組合,代號分別為:D11、D12至D44。每個處理組合接種3瓶,每瓶接10個葉片基部,長度約為
2 結果與分析
不同濃度激素組合對葉片成苗和結鱗莖的處理效果見表1。
2 1 成苗率
成苗率是指所出的苗數占接種的葉基部總數的百分數。隨著6 BA濃度的加大,成苗率呈降低趨勢。從4個濃度的6 BA看,不加6 BA的處理(D11、D12、D13、D14)成苗率最高,平均值為76 25%,說明6 BA對成苗有抑製作用。而適量的NAA對成苗有一定的促進作用,在這16個處理中,以D12處理成苗率最高。
2 2 增殖係數
組培百合的基本目標之一是在短時間內大量繁殖小苗和球莖,所以提高增殖係數,可在短時間內獲得更多的小苗或球莖。綜合這16個處理,以D22和D43處理增殖係數最高,分別為:1.7和2.0;其次為D12、D24和D34,均為1.6。
2 3 結鱗莖率和鱗莖直徑
結鱗莖率以不加6 BA的為最高,隨6 BA濃度加大,結鱗莖率下降;鱗莖直徑也有類似的結果。表明6 BA對結鱗莖率和鱗莖直徑有抑製作用。
2 4 株高和生根率
株高隨著6 BA濃度的加大而降低,從
2 5 小苗的栽培和處理
對於苗高3～4cm的已生根帶有鱗莖的小苗,可打開瓶口煉苗3～5d,然後移入沙∶土(1∶1)的基質中,保持溫度15～25℃,濕度70%以上,50%自然光照,可得到較高成活率。所用沙土最好是經過滅菌的,如果用未滅菌的沙土,小苗莖部容易受細菌和黴菌的侵染而腐爛,影響成活率;用高溫滅菌的沙土混合物,小苗不容易得病,長勢較未滅菌的健壯,且成活率較高。對處於芽苗階段的小苗,可繼代至MS+NAA0 03ｍｇ/Ｌ的培養基中,促進其生長;對沒有生根的小苗可繼代至1/2MS+活性炭5%的生根培養基中,進行生根培養,然後再進行移栽。
3 小結與討論
綜合以上試驗結果得出:6 BA主要有提高增殖係數的作用,但抑製結鱗莖和減小鱗莖直徑,同時抑製植株長高和生根,這與趙祥雲[5]的研究結果相似。NAA有促進成苗、植株長高和生根的作用,但過多NAA會使氣生根增多,不利於小苗生長。從成苗和結鱗莖率角度看,本試驗最優組合為D12;從提高增殖係數角度看,以D43最好;如果把成苗和提高增值係數結合起來,則D22最優。所以適當地調整6 BA和NAA的濃度比,才能得到理想的結果。本試驗對影響百合成苗和增殖的2種激素進行了初步研究,從中選出了利於成苗和增殖的最優組合。王愛勤[7]等認為糖的濃度對試管結鱗莖有影響,關於糖濃度及如何調控和增加其他一些激素使百合在試管內快速結鱗莖和增大鱗莖直徑等技術,有待於進一步研究
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