日本圓葉海棠(MalusprunifoliaBorkhvar.ringoAsami),別名丸葉海棠,是日本培育蘋果苗木中廣泛應用的一種基砧,其顯著特點是扡插繁育能力強,扡插成活率可達90%以上。經過組培脫毒的圓葉海棠生長量大,抗逆性強,嫁接親和性好,具有更穩定的生長勢,用圓葉海棠扡插繁殖取代實生播種繁殖是蘋果育苗中的一次革命。本文建立的Et本圓葉海棠快繁體係,可在短期內獲得大量無毒無性係砧木,實現周年生產,滿足蘋果苗木生產對砧木的需求。
1培養條件
①誘導培養基:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03mg/L;②增殖培養基:MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;③壯苗培養基:MS+6-BA0。1mg/L+NAA0.02mg/L;④生根培養基:1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3種培養基均加蔗糖35g/L,生根培養基蔗糖為23g/L,pH值5.8,培養溫度為25。t2,光照強度為1500~2000Lx,光照時間為14小時/天。
2生長與分化情況
2.1無菌材料的處理
選取日本圓葉海棠春季萌發抽生的新梢莖尖或帶腋芽的莖段,剪成長3~5cm的莖段置於三角瓶中,先用少許洗衣粉浸洗2~3分鍾,然後用自來水衝洗到沒有泡沫為止,在超淨工作台上,用0.1%HgCl:消毒8分鍾,再用無菌水淋洗5~6次,濾紙吸幹水分,剪成長1~2cm的單芽莖段或帶幾個較小葉片的莖尖,接種於誘導培養基上。
2.2不定芽的分化及叢生芽增殖
芽在誘導培養基上培養20天後開始萌動,伸長成無菌苗。在無菌條件下,將上述伸長苗再切段,每段1~2個芽,接人增殖培養基中,30天後可產生大量叢生芽,將叢生芽再切段,接種在相同培養基上繼代培養。增殖係數為7~8。
2.3壯苗培養
在增殖培養基中,獲得大量的叢生芽,但芽分化較多,植株生長較細弱,因此,將經過繼代增殖的小植株,在生根前接種在壯苗培養基中,進行壯苗培養,獲得健壯的無根試管苗。
2.4誘導生根及移栽
取株高2.5~3cm小苗接種到生根培養基上培養2周左右,生根率達98%。然後在調控溫室馴化生根20天,當試管苗根長2~3cm、莖幹微呈紅色、葉大而濃綠時,開口練苗3天,然後用鑷子夾出試管苗,栽入已配好營養土(珍珠岩、麥茬土和河沙按l:2:1混合)的六棱型營養缽中,用0.1%多菌靈消毒後,保持80%的濕度,兩周後開始長出新根和新葉,成活率達86%。當長出2~4片真葉時開始移人大田,成活率達98%。
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