西伯利亞百合屬於東方百合雜種係,為百合中的名貴品種群,由於其花色純白、花形奇特、芳香宜人而深受人們的喜愛,成為近年國內外市場熱銷的花卉種類之一。常采用傳統的鱗莖球繁殖方法,繁殖速度緩慢,國內主要通過進口種球進行生產,為了降低生產成本,可嚐試進行組織培養與快速繁殖。
1.百合鱗莖球外植體的滅菌
將白色西伯利亞百合鱗莖球,先經自來水衝洗40分鍾後,用毛刷擦去泥土衝洗幹淨,把鱗莖球中的鱗片葉剝下後,剔出病殘者,挑選靠近鱗莖盤基部的幼嫩鱗片葉,用刀修整,剔除菌斑及瑕疵,放入培養皿中待用。在超淨工作台上,用75%酒精浸泡30秒鍾,用無菌水漂洗後再放入0.1%Agcl2中浸泡8~10分鍾,用無菌水漂洗5次後,放入無菌的培養皿中用滅菌的濾紙吸幹水分,切成4×4毫米的小塊作外植體備用。
2.百合組培的培養基和培養條件
包括基本培養基附加不同激素組合,具體各階段培養基如下:基本培養基選用MS培養基或1/2MS培養基,以上培養基均加入0.55%瓊脂、3%蔗糖、pH5.8,培養溫度25~28℃,光照度2200~2500lx,光照10h.d-1;(1)誘導培養基:MS+2,4-D1.5+BA0.2;(2)增殖培養基:MS+BA0.5+NAA0.2;(3)生根培養基:1/2MS+NAA0.2mg/L。
3.百合鱗片愈傷的誘導、繼代增殖及生根
在超淨工作台上,將消毒處理的外植體小塊背麵朝下放在誘導基(1)中,在組織培養室中暗培養一周後進行光照培養,20天左右時鱗片表麵及切口處出現淺綠色突起,1個半月後在突起中誘導出芽叢,同時基部淡黃綠色愈傷組織長大。培養至2個半月愈傷組織中一部分發出芽叢,還有一部分繼續增殖長大,培養至3個半月時將高度生長至4~5厘米以上並生出鱗莖球的小苗移至生根培養基中生根,其它在誘導培養基中的愈傷組織部分可經切割後移至增殖培養基中繼續誘導,繼代產生大量的愈傷和芽叢。繼代培養每隔一個半月進行一次,每次繼代芽的增殖達到了約3倍,愈傷的增殖達到了約4倍。
4.練苗及移栽
移入生根培養基中的苗經一個半月生長出大量根係,並且苗基部的鱗莖球發育至直徑達2~3毫米,就可敞開瓶口在培養室中練苗。一周後,用流動水清洗幹淨根係上的培養基,移入事先噴灑過0.2%百菌清溶液的基質(沙∶花肥∶椰糠為2∶1∶1)中,放入培養箱中培養,溫度為25℃,平均光照強度2500lx,每日光照12小時。每隔兩天澆水一次,培養15天後再移入花盆或大田中生長。
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