菊花的組織培養

由於菊花的病毒病種類比較多，而且危害也較為嚴重。使用扡插繁殖苗，容易引起病毒病的擴張和蔓延，因此莖尖脫毒培養和組培快繁生產母本植株，再生產扡插苗的技術，對優良品種的脫病毒和複壯有著重要意義。

 

  一、培養基配方

 

  誘導萌芽培養基：MS+BA0.3毫克/升+NAA0.1毫克/升

 

  增殖培養基：MS+BA0.1毫克/升+NAA0.1毫克/升

 

  生根培養基：1/2MS+NAA0.1毫克/升

 

  二、培養程序

 

  菊花以組培快繁為目標最好選莖尖、莖段、花蕾為外植體培養增殖效果最好。選取用扡插苗培育的無病蟲害、健壯的植株，在其上取材，可保持其優良品種特性。在取材前2~3周，將入選株置於溫室內培養，不要對葉麵噴水，這樣能夠提高滅菌的成功率。接種前切取帶腋芽的莖段或未開的花蕾，這時花瓣外有一層薄膜包著，裏麵是無菌的。滅菌處理時莖尖的嫩葉不要剝得太幹淨，以免傷口麵暴露太大，使莖尖受到過大的損害。滅菌莖段除去葉片，隻留一小段葉柄。

 

  材料初步切割後，用洗衣粉水漂洗三次，用自來水衝淨後，將其放入含有三滴吐溫的0.1%升汞溶液中消毒12分鍾，並不時搖動，然後用鑷子將其夾入含三滴吐溫的8%次氯酸鈉溶液中浸泡8分鍾（超淨工作台上）並不時搖動。於無菌水中漂洗二次後待用。切割將莖切去1小段，這樣可減少滅菌藥物的毒害。切除莖尖上的幼葉；若是蕾須剝去花被，露出裏麵半球形的花序軸，再視其大小縱切4~6塊，接種到誘導培養基中。生長及分化外植體經培養後，一般20～40天莖尖處可分生出新芽，莖斷的葉腋處也會萌發出叢生芽，基部生長的愈傷組織也會分化出新芽。而花蕾外植體經過15～20天的培養，會形成愈傷組織；再經過20～30天的培養，愈傷組織就會分化出較多的叢生芽。將從以上外植體誘導分化出的叢生芽，分切成數塊放入增殖培養基中繼代培養。

 

  開始分化率和分化苗的數量都較小，隨繼代次數增加，分生苗很快就能夠增多起來。增殖的方式除誘導叢生芽增殖外，還可用莖切段作微型扡插來繁殖，它的增殖速度也完全能滿足快速繁殖的要求。方法是用各種再生途徑產生的嫩莖為材料，培養其長到一定高度時，把它切成節段，一般是一葉為一段，然後將切斷的基部插入增殖培養基中培養。28天後，腋芽即可長成新的小植株，重複上述的方法不斷進行繼代培養，從而達到快繁殖目的。生根培養在繼代培養基中培養25～30天進行轉瓶時，將那些生長正常，苗高達到2～3厘米的單株嫩莖切下，插到生根培養基中，7天後可形成有突起的淡綠色根原基，經過2周培養後，即可生根。菊花的生根非常容易，在多種生長素濃度下，乃至不加任何生長素的培養基上，都可以獲得100%的生根效果。

 

  三、質量標準及調控技術

 

  菊花出瓶苗的標準時葉色濃綠，粗壯，苗高2～3厘米，有根且根係發達。經過渡培養的下地苗，則要求小苗葉色正常，濃綠，植株矮壯。

 

  菊花在培養瓶中培養的溫度適應範圍較寬，在22℃～28℃都可以。但溫度過低，會使苗質脆弱，生長速度延緩；溫度過高培養基水分蒸發較快，致使植株還未分化到所需程度，就開始出現幹萎。所以溫度最好在24℃～26℃之間。培養室光照每天12小時，光照在1000～4000勒克斯都可以生長，但是光照過弱會使幼苗出現徒長現象，莖軟葉細弱，低質量的組培苗，出瓶後的過渡成活率也低。因此光照以2500～3000勒克斯為宜。用來生根的單株嫩莖必須有1～2厘米高，在生根培養基上生長15天後，苗高才能達到2～3厘米，有2~3條根長達1～2厘米的不定根。最好生根率達100%後，才可出瓶煉苗。如若還有少部分植株未長出足夠的根係時，可將瓶苗在上述環境培養條件下延緩幾日，待其長出根係時再出瓶。

 

  四、出瓶苗的過渡管理

 

  菊花的有根苗移栽成活容易，將有根的植株從瓶中用鑷子輕輕夾出，洗淨根部黏附的瓊脂，栽入珍珠岩基質中。移栽前期將空氣濕度保持在75%～85%之間，遮光率為40%，環境溫度控製在20℃～26℃，就可使試管苗在20天左右移栽成活，並長出新根新葉。經1～2個月的管理，便可定植於富含腐殖質，經過滅菌處理的砂質壤土中。菊花喜歡微潮偏幹的土壤環境，在定植時不必施用基肥，隨著小苗對外界環境的適應，可每隔1～2周追稀液體肥料一次。由於菊花有忌高溫、喜涼爽的習性，菊花試管苗定植後，不可接受過強的日光照射，應該采用先遮蔭再逐漸增加光照的管理方法。由於菊花的過渡成活率比較高，所以有時也可以從瓶內出來就直接下地栽培。